请问怎么用双缩脲法,设计一个测定蛋白质含量的定量方法(标准线法除外)
来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:生物作业 时间:2024/05/22 01:54:22
请问怎么用双缩脲法,设计一个测定蛋白质含量的定量方法(标准线法除外)
这.
双缩脲法本来就不是一个定量的好办法,主要是它的灵敏度太低.
要作为定量方法,还不让做标准曲线,这个有点不靠谱.
不过难道这个题的意思是拿EDTA或者HCl去滴定,滴定到颜色变成蓝色为止,然后计算EDTA或者HCl的用量?
网上还查到这个:
Folin-酚试剂法(Lowry法)
Folin—酚试剂法最早由Lowry确定了蛋白质浓度测定的基本步骤.以后在生物化学领域得到广泛的应用.
此法的显色原理与双缩脲方法是相同的,只是加入了第二种试剂,即Folin—酚试剂,以增加显色量,从而提高了检测蛋白质的灵敏度.这两种显色反应产生深兰色的原因是:在碱性条件下,蛋白质中的肽键与铜结合生成复合物.Folin—酚试剂中的磷钼酸盐—磷钨酸盐被蛋白质中的酪氨酸和苯丙氨酸残基还原,产生深兰色(钼兰和钨兰的混合物).在一定的条件下,兰色深度与蛋白的量成正比.
双缩脲法本来就不是一个定量的好办法,主要是它的灵敏度太低.
要作为定量方法,还不让做标准曲线,这个有点不靠谱.
不过难道这个题的意思是拿EDTA或者HCl去滴定,滴定到颜色变成蓝色为止,然后计算EDTA或者HCl的用量?
网上还查到这个:
Folin-酚试剂法(Lowry法)
Folin—酚试剂法最早由Lowry确定了蛋白质浓度测定的基本步骤.以后在生物化学领域得到广泛的应用.
此法的显色原理与双缩脲方法是相同的,只是加入了第二种试剂,即Folin—酚试剂,以增加显色量,从而提高了检测蛋白质的灵敏度.这两种显色反应产生深兰色的原因是:在碱性条件下,蛋白质中的肽键与铜结合生成复合物.Folin—酚试剂中的磷钼酸盐—磷钨酸盐被蛋白质中的酪氨酸和苯丙氨酸残基还原,产生深兰色(钼兰和钨兰的混合物).在一定的条件下,兰色深度与蛋白的量成正比.
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