rtpcr时为什么有两条引物-搜答案-智慧作业帮

因为RT-PCR的模版是单链的RNA,一种引物就够了,而常规PCR的引物是双链DNA,需要上下游引物从两端同时扩增.

因为DNA聚合时需要3‘OH,这个只能由引物提供（没原因,就因为是那样）.这个引物是一小段RNA,引物绝对是RNA,而不是DNA.看看DNA复制需要什么酶就知道了,需要依赖DNA的RNA聚合酶（DDR

你理解的没错.上下游引物同时用才能特异性扩增中间的那部分片段.

那是一对引物,通常所说的正向,反向.他们的碱基不一样,当然Tm值也就不一样了.所以设计引物时尽量设计一术的Tm值,有利于选择最佳的退火温度.

DNA的合成必须3-OH,也就是说核苷酸必须要连接在3-OH上才能够合成延伸RNA引物就是提供3-OH的作用.而RNA的合成不需3-OH,所以引物用RNA比较好.事实上,只要是能提供3-OH的核苷酸,

构建载体需要酶切的,所以需要加接头的!

体内DNA复制也是有引物的,你好好再看看课本吧.引物在PCR以及DNA复制中的作用就是起到引导DNA聚合酶结合和开始聚合反应的过程.

解题思路：在PCR技术中双链DNA分子中每条链都要和引物结合，进行复制。解题过程：解析：引物在PCR以及DNA复制中的作用就是起到引导DNA聚合酶结合和开始聚合反应的过程。因为PCR中，DNA聚合酶不

ATCG.原理就是体外环境模仿人体内环境,完成人体内的DNA复制,大概就这样.

是不是就是forward和reverse如果是双链DNA做模板的PCR的话就无所谓但是如果是RT-PCR,从RNA生成单链cDNA的话,你的forwardprimer必须跟原来的RNA的序列一个方向,

DNA复制起始阶段DNA聚合酶需要借助RNA引物后的3‘-OH来将dNTP连接到先导链上,然后激活复制.而PCR只是一种单纯的扩增技术,DNA和RNA均满足条件.

RNA在外界容易降解,所以在体外用DNA.这样比较容易操作.

Tm指的是把DNA的双螺旋结构降解一半时的温度.我们PCR时候,当然不能用Tm值来作为退火的温度.一般来说,退火温度比Tm值要低上5度左右.但是这个也不是绝对的.建议你如果说模板比较充足的话,做一个梯

博凌科为-为你是这样,其实片段在一定的范围最好,为什么呢,太长了,片段多,可错配几率就很高,举个例子：两条高特异性的引物如果串成个长的引物,它的错配率不是高了一倍,但为什么说在一定范围呢,因为错配和T

为什么需要有RNA引物来引发DNA复制呢?这可能尽量减少DNA复制起始处的突变有关.DNA复制开始处的几个核苷酸最容易出现差错,因此,用RNA引物即使出现差错最后也要被DNA聚合酶Ⅰ切除,提高了DNA

为了保证复制的高保真性.因为5’新合成的链没有经过3’到5’的校正,可能会有一些偶然发生的错配.而引物为RNA,可以方便的与DNA区别,被生物体所识别,并随后校正.

DNA在单链情况下没有RNA稳定!容易发生变异!

我理解你的意思是以ProkⅡ质粒为模板来设计引物,扩增其上一段能表达的DNA序列对么?质粒上的序列不像基因组上的序列那样复杂,每段DNA序列的功能都是已知的,没有多余序列.多克隆位点的位置在质粒上是固

理论上退火温度越低越利于引物和模板结合,但是有时候就是这样的,低的退火做不出来,高的做出来,我也碰到过这样的情况.其实影响PCR扩增的因素远比我们知道的多得多.我的猜测是这样的,可能刚好在这段引物或者

这可能尽量减少DNA复制起始处的突变有关.DNA复制开始处的几个核苷酸最容易出现差错,因此,用RNA引物即使出现差错最后也要被DNA聚合酶Ⅰ切除,提高了DNA复制的准确性.