RNA提取中异丙醇析出的沉淀是什么
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/17 00:19:26
要看你引物的设计,如果没有跨一个内含子的话,是不能检测出的.其实有无DNA污染,可以做一个不经反转录的RNA作为对照模板或者RT-PCR引物跨内含子
漂洗各种盐离子,沉淀核酸.
提问的女孩2011-1-13因为低温可以促进DNA的沉淀,在DNA量很少的情况(比如你的实验)可以提高抽提效率.不过如果DNA量较多时,常温也没问题,比如我们做小鼠脚趾的基因型鉴定时,都是常温操作的,
氯仿抽提蛋白异丙醇沉淀RNA乙醇洗掉DNA
一般氯仿异戊醇都是室温就可以了,你提取的什么组织呢?再问:我取的是丁香叶片有点老现在提取不出来怎么办?提取出来的都是跟果冻似的东西,有极少有白色絮状沉淀,但是跑电泳根本没有东西,有絮状的电泳显示是RN
二者没有什么本质区别.不过异丙醇沉淀效率高一些.用异丙醇沉淀的话等体积就可以了,用无水乙醇的话要用二倍体积去沉淀.
经典的TRNzol法中有一步是加DNase的.这就是除DNA的一步.CTAB法中是加入LiCl这一步除去的DNA.氯化锂可以选择性沉淀RNA.
楼上的朋友都谈出了一点,但是并不是很全面,对于盐的析出,我们要从温度、溶剂、溶质、溶解性等方面来综合考虑,碳酸钠转化为碳酸氢钠属于候德榜制碱法的最后一步,对于这个问题的分析如下:足量的CO2通入饱和N
有卤素的离子或者有磷酸钙磷酸镁之类的,就是能和Ag+和PO43-反应有沉淀就是了
这个是要看情况的.平常我们都用异丙醇沉淀,因为它沉淀效果比较好,但是异丙醇不容易除去,要用乙醇洗,乙醇就很容易除去啦
变浑浊吧,变成白色沉淀啦.是dna和少量蛋白质析出.
配制方法:在大烧杯中加入80mL去离子水,再加入300g苯酚,在水浴中加热搅拌、混合至苯酚完全溶解.将该溶液倒入盛有200mL去离子水的1000mL分液漏斗中,轻轻振荡混合,使其成为乳状液.静止7~1
提取RNA主要是为了对基因表达进行分析.提取DNA主要是对基因和基因组进行分析.
加完氯仿是用异丙醇析出RNA,我们是用75%的乙醇(用DEPC水来配)洗涤,乙醇是去各种离子的,无水乙醇不能去除离子,洗完之后一定要完全晾干,然后加入适量的DEPC水,在60度中水浴,直至溶解,如果部
异丙醇是沉淀核酸用的,作用和乙醇一样.只不过用量少一点,0.6V~1V就够了,不像乙醇沉淀需要至少2V,一般需要2.5倍体积.在水相很多,离心管容积有限,加不下太多乙醇的时候一般会用异丙醇沉淀.异丙醇
C.H3PO2是很强的还原剂其他的P都是+5价,不能再被氧化
因为低温可以促进DNA的沉淀,在DNA量很少的情况(比如你的实验)可以提高抽提效率.不过如果DNA量较多时,常温也没问题,比如我们做小鼠脚趾的基因型鉴定时,都是常温操作的,沉淀照样超多.
加入LiCl这一步.氯化锂可以选择性沉淀RNA.
这是食品添加剂的一种,加入异丙醇只是为了增加口感,一般性是不会中毒的,只要不过量,
氯仿抽提蛋白异丙醇沉淀RNA乙醇洗掉DNA