酚试剂法测定蛋白质含量和双缩脲法比较,哪个更加灵敏,为什么
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/08 15:56:26
这是最经典的方法了——微量凯氏法一、原理植物组织中的有机氮化物包括蛋白氮和非蛋白氮.非蛋白氮主要是氨基酸和酰胺,以及少量无机氮化物,是可溶于三氯乙酸溶液的小分子.可加入三氯乙酸,使其最终浓度为5%,将
多采用凯氏定氮法,检测的是粗蛋白,原理是检测其中的氮含量,因为氮含量在真蛋白中大约是16%左右,倒数就是6.25,所以,检测出氮含量后,乘以6.25就是粗蛋白含量了.缺点是把非蛋白中的氮也算进去了,所
酚类、柠檬酸、硫酸铵、Tris缓冲液、甘氨酸、糖类、甘油等均有干扰作用.浓度较低的尿素(0.5%),硫酸纳(1%),硝酸纳(1%),三氯乙酸(0.5%),乙醇(5%),乙醚(5%),丙酮(0.5%)等
采用最大吸收波长处测量,可以使标准曲线斜率最大,范围最广,于是拟合出来的直线更准确,对样品的检测也越灵敏.
原理:FOLIN-酚试剂可以和游离的酪蛋白螯合,呈蓝色,可以通过OT检测,判断溶液中的游离酪蛋白含量.注意:注意OT测量对比空白样品中的蛋白含量.
没有特别的要求,这个方法的原理是试剂和蛋白质中酪氨酸、苯丙氨酸残基反应显色,蛋白只要能溶于水形成均匀澄清溶液,不会影响显色,就可以了.
没有特别的要求,这个方法的原理是试剂和蛋白质中酪氨酸、苯丙氨酸残基反应显色,蛋白只要能溶于水形成均匀澄清溶液,不会影响显色,就可以了.
蛋白质含量测定法,是生物化学研究中最常用、最基本的分析方法之一.目前常用的有四种古老的经典方法,即定氮法,双缩尿法(Biuret法)、Folin-酚试剂法(Lowry法)和紫外吸收法.另外还有一种近十
不能,FOLIN酚法测定是可溶蛋白质,鱼粉蛋白质不溶于水,难以用这种方法测定.可以用凯式定氮法测定.先硝化后测定.
当然不是一、微量凯氏(kjeldahl)定氮法样品与浓硫酸共热.含氮有机物即分解产生氨(消化),氨又与硫酸作用,变成硫酸氨.经强碱碱化使之分解放出氨,借蒸汽将氨蒸至酸液中,根据此酸液被中和的程度可计算
常用紫外分光光度法测定蛋白质含量.以下引用:6种方法测定蛋白质含量一、微量凯氏(kjeldahl)定氮法样品与浓硫酸共热.含氮有机物即分解产生氨(消化),氨又与硫酸作用,变成硫酸氨.经强碱碱化使之分解
紫外吸收法是以含有苯环的氨基酸为基础测量的,OD280值,各种蛋白含有的苯环的氨基酸数量不一定,所以只是大致估计.LowryProteinAssayKit福林酚蛋白浓度测定试剂盒\x05产品说明:在碱
不可以,只能证明蛋白质的存在
加入双缩脲试剂,发生紫色反应证明有蛋白质存在
--不做标准曲线你怎么通过吸光度来计算浓度?因为两者反应更灵敏,至于为什么反应更灵敏,问化学牛人.
优点:是灵敏度高,比双缩脲法灵敏得多;重复性好.颜色深,析光度.缺点:是费时间较长,要精确控制操作时间,标准曲线也不是严格的直线形式,且专一性较差,干扰物质较多.近年来folin-酚法逐渐被考马斯亮兰
Folin—酚试剂法最早是由Lowry确定的测定蛋白质浓度的基本方法.以后在生物化学领域得到广泛的应用.此法的显色原理与双缩脲方法是相同的,只是加入了第二种试剂,即Folin—酚试剂,以增加显色量,从
减少系统误差.每次测量的时候总有一些不可控制的随机的误差吧.应该是这个哈.
Folin-酚试剂法测定蛋白质含量是双缩脲法原理,所用的试剂是由两部分组成的.第一部分相当于双缩脲试剂,第二部分为Folin-酚试剂(磷钨酸和磷钼酸混合液).因此,反应的程序也是分两步进行的.第一步相
比如奶粉,奶的主要营养成分就是蛋白质,蛋白质含量直接决定其品质,所以要测.以奶粉为主食的小孩,假如奶粉里一点蛋白质也没有……