Folin-酚试剂法测定蛋白质含量为什么比双缩脲法灵敏?
来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:生物作业 时间:2024/05/15 10:57:22
Folin-酚试剂法测定蛋白质含量为什么比双缩脲法灵敏?
Folin—酚试剂法最早是由Lowry确定的测定蛋白质浓度的基本方法.以后在生物化学领域得到广泛的应用.此法的显色原理与双缩脲方法是相同的,只是加入了第二种试剂,即Folin—酚试剂,以增加显色量,从而提高了检测蛋白质的灵敏度.
Folin—酚试剂由甲试剂和乙试剂组成.甲试剂由碳酸钠,氢氧化钠,硫酸铜及酒石酸钾钠组成.蛋白质中的肽键在碱性条件下,与酒石酸钾钠铜盐溶液起作用,生成紫红色络合物.乙试剂是由磷钼酸和磷钨酸、硫酸、溴等组成.此试剂在碱性条件下,易被蛋白质中酪氨酸的酚基还原呈蓝色反应,其色泽深浅与蛋白质含量成正比.
由此可见是它们的显色灵敏度不同造成的.
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