p53的rt-pcr的引物序列

同楼上,当初我问老师这个问题时,他说大学才学这么深

RT-PCR和一般的PCR相比原理上没有太多的区别,无非就是在反转时候RNA的定量,不同模板的设定.对引物没有特别的要求,能特异代表目的基因就行.real-timePCR根据原理的不同,引物选择也不同

一般未知的序列旁边都有已知的一段吧,就是你说的“修饰片段”?PCR这种flankingsequence可以有很多方法,比如TAIL-PCR,用ADprimer（简并引物）和特异性引物就可以得到目标片段

正向引物：5'CTTCGAAATTC反向引物：5'CCGATCGGGAGA(TCTCCCGATCGG的反向互补序列）当然,这对引物有些短,其实真正设计时上下游引物的序列中都可包含部分基因1的序列,以平

关键就是这个引物的设计,如果你能设计好并且成功RT-PCR,那就没问题了.

什么跟什么说的太不清楚饿了只要你需要的那段序列是对的不就行了嘛跟引物序列有啥关系毕竟大部分的PCR引物设计都是在需要的序列两端隔一段距离而且如果你测序是拿PCR引物测的话那前面的几十个碱基都是测不准的

引物可以通过一些软件设计,比如primer5,但是还需要注意一些细节问题.比如1.引物最好在模板cDNA的保守区内设计.DNA序列的保守区是通过物种间相似序列的比较确定的.在NCBI上搜索不同物种的同

用“p53Gallusgallus”和“p53Homosapiens”在NCBI的database中的“gene”选项中搜索即可.这个是人的：

FPrimer:5'-TTGTAAAAAAATTAAATTAA-3'RPrimer:5'-CATATTTTAATTAATATTTC-3'你这个序列AT含量太高,尤其是5'端A有7个连续重复,引物本身很

一般的RT-PCR引物是不能用来做是实时荧光定量的的引物的,但是你可以设计出兼顾二者的引物,除了要注意一般引物设计的原则外,愚见认为还要注意下两个问题：

现在你到了基因序列的网站,最下面的那一大段就是外显子2到9的序列.一般设计RT-PCR引物需要跨外显子交界,这样可以提高特异性.你可以先拷贝外显子2的序列（216..289）atggaggagccgc

`````````````````````分给我吧,别浪费了

你要的是人的还是鼠的阿大鼠编码框184atggaggattcacagtcggatatgagcatcgagctccctctgagtcaggagacattttcatgcttatggaaacttcttcct

即nestedPCR,是指利用两套PCR引物（巢式引物）对进行两轮PCR扩增反应.在第一轮扩增中,外引物用以产生扩增产物,此产物在在内引物的存在下进行第二轮扩增.由于巢式PCR反应有两次PCR扩增,从

我也做得RT-PCR,是提取某物种中未测序的一段基因.是用近缘物种基因进行比对,得到保守序列设计引物,再提取总RNA,RT-PCR得到目的基因的片段再问：我需要检测的分子，在nucleotide里找不

跟一般的PCR一样哇,PrimerPremier、Oligo都可以哦.

根据cDNA序列设计就行了,不用加3‘utr,你做载体构建还是tr-pcr基因检测?再问：做rt-pcr检测。我们老板说要加上3‘utr的序列，不知道为什么？再答：不用加，我做rt-pcr检测那么多了

那是显然的,所以在提rna做pcr的时候,如果里面混了基因组dna,那就有可能导致假阳性再问：谢谢，但是这不是我想要的答案。请问做半定量RT-PCR的引物怎么设计？可以设计在基因的非翻译区，然后扩非翻

这个问题很简单,扩增序列应该称为目的基因,目的基因一般都上万bp,从两头开始当然不合适.PCR扩增只能扩增出上下游引物之间的序列,因为只有引物之间的DNA双链是解链状态的.你的问题说明你对基础知识掌握

没错,DNA的两条连是互补的,但是引物绝对不可以互补.引物是放在DNA两条连的各一端引导游离DNA上DNA链,不仅不可以互补,还要尽可能的不同.