质粒提取 菌液的OD值
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/26 04:35:32
中稳定存在,经多次转接后有可能造成质粒丢失.因此不要频繁转接,每次接种时应接种单菌落.另外,检查筛选用
我们也会遇到这样的问题,通常情况下,我们都是采用4℃保存,但是不超过24小时.这是我们的使用情况.
1.2.0
只要制备胶等过程都没问题,marker也跑出条带了,那这种情况最有可能的原因还是质粒的浓度过低.所以,虽然OD值可测出来,但胶显示不出来,我就遇到过这样的情况,还算很普通的现象.下次再加大菌量就行.再
这里不是指质粒有A\B型啦,是指这个公司有几种不同的提质粒的盒子.可能有的是大抽质粒,有的是有除内毒素这个步骤的,你可以看看别人的说明书
稳转吧?顺转不用切再问:酶切后纯化时能用普通胶回收试剂盒吗再答:单切回收其实不用跑胶有一种pcr产物回收或者dna片段回收试剂盒就行不知道胶回收试剂盒能不能不跑胶直接用
首先要知道,质粒是共价,闭合,环状的DNA(cccDNA).以常用的碱裂解法为例:当菌体在NaOH和SDS溶液中裂解时,蛋白质与DNA发生变性,当加入中和液后,质粒的cccDNA分子能够迅速复性,呈溶
细菌质粒是重组DNA技术中常用的载体,提取后可用作构建基因表达载体.
1至2之间
对质粒,双链DNA:1OD(260)=50μg/ml
如果是普通分光光度计,那就需要一个试剂盒,不过我不知道质粒应该用什么样的,可以去生物公司销售人员问一下.具体操作步骤:1、按照试剂盒说明书配出待测液.2、常规分光光度计使用方法,很多人都会.主要步骤包
质粒DNA提取一般用沸水浴法和碱裂解法,现在一般都采用碱裂解法,并有试剂盒可用,它主要是将细胞内的环状质粒提取出来,一般需要用SDS裂解,RNA酶降解,然后过柱,再进行洗脱.过程比较简单.而基因组DN
尽量主要是为了灭火dna酶
2412114719联系我,
汗,没听说过氨苄青霉素可以破坏细胞壁的,这样子的话就不需要碱裂解了,氨苄青霉素肯定是在扩增菌体的时候加入培养基的,不会对提取本身造成影响,但是可以阻止杂菌生长,增加目的质粒的拷贝数(前提是,质粒是氨苄
据我自己的经验,这种情况往往是由于操作不当引起,可能有如下原因:1,菌体量可能过大,裂解不充分,或裂解液与中和液比例不适当;(调整菌液量或缓冲液量)2,混合时过于剧烈,可能会带来基因组DNA片段的污染
基因组DNA可以提取,质粒DNA也可以提取,要看你需要的目的基因是位于基因组上还是质粒上,要哪个部分就提取哪个部分.在基因工程中,质粒是一个非常理想的载体,大部分的目的基因会先导入到质粒中进行扩增,所
溶液2中的主要成分是NaOH和SDS,是用来裂解细胞的.因为NaOH遇到二氧化碳容易反应生成碳酸氢钙,影响使用效果,因此要现配现用.SDS的话,低温容易产生沉淀.不过在37°C水浴一下就好.主要还是N
碱提法:一、试剂准备1.溶液Ⅰ:50mM葡萄糖,25mMTris-HCl(pH8.0),10mMEDTA(pH8.0).1MTris-HCl(pH8.0)12.5ml,0.5MEDTA(pH8.0)1
以东盛生物的为例bufferP1:除去RNAbufferP2:裂解细胞bufferP3:沉淀DNAbufferWA、bufferWB:都是洗涤液(这两个之间有什么区别我也不清楚)TE:溶解DNA.