考马斯蓝测蛋白读数下降怎办

应为不知道你的标准曲线Y的单位,如果是以加入的标准品的质量做出的曲线,同时没有什么稀释过程的话,你就直接算好了：Y=0.0044*68.790+0.0245=0.327176（单位）,总蛋白量=0.3

标准曲线可以自己测定的.一般试剂盒上也有啊

c=266.85A595-10.254(μg/mL),r=0.9897,实验点为8,结果如下：A595牛血清清蛋白浓度c(μg/mL)000.125250.2325500.3475750.451100

你加入的试剂的量是否一样,比如考马斯亮蓝的体积之类的.再问：考马斯亮蓝的体积是一样的，其他试剂的体积严格按照表中用移液器加入的再答：个人觉得如果你的步骤完全正确，那么吸光度在0.097-0.229之间

太浓了不好上样么.再问：是染色不好染么？上样是什么意思？再答：是先跑胶再染色么上样就是把样品加到胶孔里不知道你这是怎么测浓度对比标准品的亮度么如果浓度太大亮度没法区分开不就不好算浓度了

标准曲线制作—考马斯亮蓝法测蛋白质含量一、标准曲线一般用分光光度法测物质的含量,先要制作标准曲线,然后根据标准曲线查出所测物质的含量.因此,制作标准曲线是生物检测分析的一项基本技术.二、蛋白质含量测定

Bradfordassay的线形关系有一定限制,在2µg/ml到120µg/ml之间才存在线形关系.你首先要确定你的稀释倍数是不是符合标准.另外,就是蛋白质本身的氨基酸构成了.

该方法用于大多数蛋白质的定量是比较精确的,但不适用于小分子碱性多肽的定量.如核糖核酸酶或溶菌酶.去污剂的浓度超过0．2％影响测定结果.如TritonX-100、SDS、NP-40等.1．Bradfor

会的.不仅碱性氨基酸,去垢剂,如SDS,还有高浓度的缓冲液都会有影响.而且由于蛋白质酸性,碱性氨基酸含量不同,即使蛋白质浓度相同,所测出的值也会不同.

将100mg考马斯亮蓝G-250溶于50m195％乙醇,加入100ml浓磷酸,然后,用蒸馏水补充至200ml,此染液放4℃至少6个月保持稳定.—————————————————————————————

考马斯亮蓝G-250（CoomassiebrilliantblueG-250）测定蛋白质含量属于染料结合法的一种.考马斯亮蓝G-250在游离状态下呈红色,最大光吸收在488nm；当它与蛋白质结合后变为

降低染色液浓度,缩短染色时间.考染太过,会使得所有蛋白质表面都包着厚厚的一层染料,无法定量.只有降低染色液浓度,缩短染色时间才能使得染色回到线性区域,让染料强度和蛋白质浓度成正比.

1.分光光度计预热下会准些2.是否调0\100,3.用紫外的试试看楼主可曾换一台分光光度计试试,有些仪器时间长了不准的

先将以有机溶剂提取的待测样品作进一步纯化,充分除去有机溶剂；然后以水或氯化钠溶解,同标准曲线法测定样品液的OD值.

标准曲线制作—考马斯亮蓝法测蛋白质含量一、标准曲线一般用分光光度法测物质的含量,先要制作标准曲线,然后根据标准曲线查出所测物质的含量.因此,制作标准曲线是生物检测分析的一项基本技术.二、蛋白质含量测定

当然不对,你可用BCA法定量

我做过这个,R=0.9986,测蛋白就是用这个方法.你可以找国标嘛,步骤都很详细.

是液体就好测了呀把样品取出1ml,按照做标准曲线时一样的处理,再测OD值就行了

1.捣碎洋葱,但不能加去污剂,加去污剂会影响比色结果.过滤（假设你没有标准曲线）2.取一定量（这个其实可多可少,主要是每次分量一样就行）考马斯亮蓝G-250（别用成R-250!）,与已知浓度（浓度要小

不用固定,染色液中乙酸就有固定的作用,染色液配方：甲醇：水：乙酸=4.5:4.5:1或5:4:1再问：请问，AC固定是起什么作用的？谢谢。。。再问：请问，AC固定是起什么作用的？谢谢。。。