流式细胞仪可以检测到GFP荧光吗
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/10 04:39:05
要了解荧光剂要先了解荧光反应,荧光反应就是物质接受紫外线不见光的照射后会被激化,之后会把被激化的能量转换成肉眼可见的光释出.其实荧光反应在自然界也相当常见,像是有些食物、药物、叶绿素、细菌甚至霉菌在紫
可以.这个是流式细胞仪一个常见的应用.上流式细胞仪以前,需注意的是1.细胞打散到单细胞的悬液,没有聚团成块.如果有顾虑的话用纱网过滤一次才用.2.细胞悬液的浓度不能过高和过低.详请参考你的仪器说明建议
只能先就标题的问题谈谈我的认识.后面的追问我了解得也不全面.1.两者的结果检测方法不同.GFP绿色荧光蛋白,很直观,能够直接检到荧光,在普通的细胞培养条件下都能够观察到,对细胞的生命活动和其他并行的实
不能,可以用annexinV-PE或者其他方法,比如anti-activecaspase3-PE/APC等再问:看到一篇核心期刊的文献居然做了。很是疑问。fitch是绿色荧光,用屁股想,应该是会影响的
GFP和PI的激发光有很大的重叠.做compensation的时候会很困难.你必须提供GFP,Annexin5和PI单个阳性的细胞.
PI肯定不行了你是要做凋亡么那就没办法了吧Annexin倒是可以用如果是想染核的话还可以用DAPI蓝色加抗生素对细胞状态肯定有影响的不过你只要保证要么一直加抗生素要么一直不加不会对结果有大的影响
首先,你这个实验室双色的,就要做compensation.技师应该和你说明的啊.如果你自己做的话,我简单和你说一下:RFP和GFP的激发光谱有部分是重叠的,所以必须在检测的时候去掉重叠的部分(comp
原子荧光光度计利用惰性气体作载气,将气态氢化物和过量氢气与载气混合后,导入加热的原子化装置,氢气和氩气在特制火焰装置中燃烧加热,氢化物受热以后迅速分解,被测元素离解为基态原子蒸气,其基态原子的量比单纯
1.是100个细胞中表达CD33的细胞占80%2.CD33是粒细胞表面标志;CD19是B细胞表面标志.没有阳性阴性一说.主要是看是否是克隆增殖(癌变)3.见异常细胞是诊断标准,CD33达80%,提示是
能检测到,敏感度比westernblot高多了,就是ELISA也比westernblot高啊
一般流式细胞仪都有FITC通道,GFP可以用该通道来测量.用同一细胞系的转染了无GFP质粒的细胞做阴性对照,设置阈值.
很简单的啊.流式细胞仪数据分析5.1数据采集及显示光信号转换成电压脉冲后,再通过模数转换器转换成为计算机能够储存处理的数字信号.流式细胞仪的数据以FSC标准格式存储,该标准由“分析细胞学协会”制定.根
流式细胞仪不是ECT,他只能识别不同的荧光,一般有四个荧光通道FL1-FITC,FL2-PE,FL3和FL4的激光不同厂家可能不同(主要是BD和BECMAN),所以只要是悬浮的颗粒,只要可以标记上荧光
用PI单染就可以,PI是用来测细胞周期的,在单倍体峰前如果有个亚峰则表明有凋亡,但是这个方法不是很好,坏死细胞也会包含在内.准确地说用PI单染测出的凋亡率应该是死亡细胞占细胞总数的比例.建议用Anex
1,载体是否有问题?gfp连接方向?启动子是否匹配?2,没转进去?或者转进去之后没表达?3,荧光显微镜设置是否妥当?
只有在结合后,复合物的分子构型发生变化,可以吸收488nm的光能,然后发出522nm光.不结合,没有分子构型变化,就不能吸收光能.
转染率是大概估计一下,有荧光的占总细胞的比率,如果要精确值可以去做流式.再问:请问具体做流式要怎样做,能说具体一点吗?转染率很低做流式会不会没效果?比如不到1%,那流式可以测出来吗?再答:你的转染目的
可以细胞内染色技术细胞因子胞内染色依赖于预先对细胞进行固定、破膜处理后鉴定细胞因子特异性抗体染色的荧光信号.
荧光补偿是因为每个荧光的光谱都比较宽.用你的例子来说,就是PI的荧光,不仅被PI这个通道的探测器所感应到,而且也同时被FITC的探测器感应到,所以一个PI染色会出现在双染的区域.另外FITC的荧光,也
不对细胞膜的结构是磷脂双分子层大分子无法通过间隙通过胞吞胞吐通常