作业帮流式检测GFP表达
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/05/11 00:43:07
可以.这个是流式细胞仪一个常见的应用.上流式细胞仪以前,需注意的是1.细胞打散到单细胞的悬液,没有聚团成块.如果有顾虑的话用纱网过滤一次才用.2.细胞悬液的浓度不能过高和过低.详请参考你的仪器说明建议
只要没有整合到基因组DNA,转染进入的外源性DNA都会随着细胞分裂而被稀释.所以经过10天后表达肯定是会减弱的,这是正常现象.只有当外援DNA整合到基因组后,表达水平才能稳定
GFP和PI的激发光有很大的重叠.做compensation的时候会很困难.你必须提供GFP,Annexin5和PI单个阳性的细胞.
首先,你这个实验室双色的,就要做compensation.技师应该和你说明的啊.如果你自己做的话,我简单和你说一下：RFP和GFP的激发光谱有部分是重叠的,所以必须在检测的时候去掉重叠的部分（comp
1.是100个细胞中表达CD33的细胞占80%2.CD33是粒细胞表面标志；CD19是B细胞表面标志.没有阳性阴性一说.主要是看是否是克隆增殖（癌变）3.见异常细胞是诊断标准,CD33达80%,提示是
能检测到,敏感度比westernblot高多了,就是ELISA也比westernblot高啊
当然可以只要你包被的抗原可以与目的蛋白反应就行再用蛋白免疫一种实验动物得到抗体作为结合酶标二抗的底物这样就完成了一个夹心ELISA
有很多种方法,以下列举几种：1,蛋白磷酸酶活力检测（kinaseactivityassay）2,利用专一的磷酸根抗体（phospho-specificantibody）3,西方墨点法或蛋白质印渍法（W
可以,其实就是northernblot了.不过这是在转录水平上的检测.要检测是否表达为蛋白质还是需要做westernblot.
免疫荧光法抗体抗原杂交法免疫组化监测
一般流式细胞仪都有FITC通道,GFP可以用该通道来测量.用同一细胞系的转染了无GFP质粒的细胞做阴性对照,设置阈值.
很简单的啊.流式细胞仪数据分析5.1数据采集及显示光信号转换成电压脉冲后,再通过模数转换器转换成为计算机能够储存处理的数字信号.流式细胞仪的数据以FSC标准格式存储,该标准由“分析细胞学协会”制定.根
检测到目的基因导入了并不一定说就能表达出来,这里面还有很多其他的原因会导致基因是否表达,所以一般要先检验目的基因是否导入之后（如果导入了但又没表达,这时可以研究是其他原因了）,再去检验是否表达.这是一
（1）由于图中GFP的M端伸出的核苷酸的碱基序列是-TCGA-，因而M端是限制酶HindⅢ剪切形成的黏性末端，N端伸出的核苷酸的碱基序列是-TGCA-，因而N端是限制酶PstⅠ剪切形成的黏性末端．（2
（1）从图示可知，GFP的M端伸出的核苷酸的碱基序列是TTCGA，是限制酶HindⅢ酶的切割位点；N端伸出的核苷酸的碱基序列是CTGCA，是限制酶PstⅠ切割位点；则在构建含该GFP的重组质粒A时，应
(1)HindIII和PstⅠ Ti质粒(2)2(3)目的基因 标记基因(4)核移植 胚胎移植
GFP,即绿色荧光蛋白（GreenFluorescentProtein)2001年1月11日,美国科学家宣布培育成世界上首只转基因猴,这是世界上首次培育成功转基因灵长类动物.添加在这只名为"安迪"的猴
将这个基因和某种报告基因（如GFP,GUS）融合在同一个表达载体上,转化生物体,看报告基因在哪表达,就说明基因在哪表达.
PCR扩增人体骨髓间充质干细胞特异表达的基因的完整cDNA,和GFP融合.用那种载体要看你的转化方法了.