大提质粒做酶切
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/17 04:00:55
用70%的酒精是因为这个浓度对沉淀DNA效果最好,并且异丙醇能溶于酒精,去除异丙醇,然后挥发酒精,似乎还能除盐.个人见解.异丙醇沉淀以后不必用70%乙醇洗.只有醋酸钠乙醇沉淀之后才需要70%乙醇洗,目
中稳定存在,经多次转接后有可能造成质粒丢失.因此不要频繁转接,每次接种时应接种单菌落.另外,检查筛选用
质粒是真核细胞细胞核外或原核生物拟核区外能够进行自主复制的遗传单位,包括真核生物的细胞器(主要指线粒体和叶绿体)中和细菌细胞拟核区以外的环状脱氧核糖核酸(DNA)分子.现在习惯上用来专指细菌(大肠杆菌
镜鉴了,酵母菌的形态特征应该知道吧,你看能解决么,不能我再帮你想转接少量培养物至LB液体培养基中,37摄氏度200转/分钟振摇培养过夜观察培养基
ThisaritclethroughthestepssuchasPCR,transformation,distillingplasmid,EcoRI,connectingmainlinks,purif
片段变小?你的目的片段里有没有这个酶切位点?你的目的片段有多大?建议用双酶切,将片段切出后电泳,如果有该片段,在电泳时就一目了然了.
不管酶切还是PCR,都是间接的结果.要确定克隆的正确,一定要测序的啊.你测个序,问题就迎刃而解了.到底是什么问题也就清楚了.再问:我前些天去遇到一样的问题,酶切鉴定正确,但测序后什么也不是呢再答:所以
分子水平上,用人工的方法提取(或者合成)不同的生物的遗传物质,在体外切割拼接和重新组合,然后通过不同方法把重组的DNA分子引入受体细胞,使外源DNA在受体细胞进行复制与表达,按人的需要生产不同的产物或
这里不是指质粒有A\B型啦,是指这个公司有几种不同的提质粒的盒子.可能有的是大抽质粒,有的是有除内毒素这个步骤的,你可以看看别人的说明书
好像和试剂盒没多大关系把,只能说菌没摇好,重新准备摇大瓶把,当然如果你认为是试剂盒的问题那么可以换好点的,比如axygen,或者其他更好的
稳转吧?顺转不用切再问:酶切后纯化时能用普通胶回收试剂盒吗再答:单切回收其实不用跑胶有一种pcr产物回收或者dna片段回收试剂盒就行不知道胶回收试剂盒能不能不跑胶直接用
定义:质粒是真核细胞细胞核外或原核生物拟核区外能够进行自主复制的遗传单位,包括真核生物的细胞器(主要指线粒体和叶绿体)中和细菌细胞拟核区以外的环状脱氧核糖核酸(DNA)分子.现在习惯上用来专指细菌(大
1至2之间
如果是双酶切,而且两个酶切位点不能形成自连,那么插入目的基因也只能获得一种重组质粒.如果是单酶切,或者双酶切的两个酶切位点是同尾酶,那么插入目的基因能获得两种重组质粒.
是完全没有质粒还是质粒量很低?没有的话:染杂菌了.重新复苏保藏的菌种,或者划线分离,重新鉴定.或者重新转化.质粒丢失.表达菌株或者质粒上有特殊序列的话,很容易丢失质粒.换个菌种保藏.质粒量很低:菌种老
一般在细胞内能稳定存在,为松弛控制型质粒.有标记基因,能根据标记基因的特性来判断该质粒是否转录到宿主细胞中.在目的基因之前加入了强启动子.
质粒是染色体外的遗传物质质粒对于一个细菌来说,质粒上的基因一般与细菌的特殊功能有关,其上的基因是可有可无的,比如,抗药性和分解一些特殊有机物的基因.质粒不止存在于细菌中还存在于酵母菌(真菌)中
是的.质粒都是环状的DNA分子.质粒主要存在于原核细胞中,但是真核细胞也有,比如酵母菌.
质粒是细菌内的一种小型环状DNA,Ti质粒是具体的一种质粒——专指土壤农杆菌内的质粒.