为什么荧光定量产物200bp左右

荧光定量PCR和实时荧光定量PCR是一样的啊

完全可以,PCR长度从50bp到数百都可以,不止局限于150-300个碱基对.楼上说的有道理,但是有一点要注意,最好计算一下扩增片段的Tm值,这样做溶解曲线的时候,光有一个峰还不够,而且得到的TM和你

RT可能含义：reversetranscribe是逆转录,那么相应pcr应该是由rna凡转录cdna过程realtime实时定量那么就是荧光定量pcr了

1做标曲才可以算出这对引物的扩增效率（其斜率）,方便用pfaffl方法来进行相对定量（得到的结果相对精确一点）,否则只能默认扩增效率为2,用2^-ddCt(Livak)法来计算2做标曲才可以绝对定量.

根据你的问题简洁回答一下:第一.应该一起看.从你1.7乘以10的4次方copies/ml的数据可以证明你是乙肝小三阳患者.一般来说,小三阳的病人体内的病毒量较小,传染性也不强.乙肝大、小三阳只是乙肝病

楼主说的是扩增子,即两引物目标位点之间的序列长度.PCR过程中,扩增就跟修路一样,越长越费工.在能够保证特异性的情况下,当然是越短越有效率,100-200bp就是综合两方面的考虑而建议的最佳扩增子长度

博凌科为-为你如果lz确实已经确定该基因SNP位点以及突变型,你可以选择荧光定量PCR进行检测,检测方法是：1、探针设计在突变位置,有几个突变点设计几个（不同突变型需要不同的荧光标记：例如,野生型探针

一般参考标准是1.0E+03,也就是1000,你现在是已经是4.657E+07,也就是46570000了,很高了,请及时治疗吧.

最好还是在冰上做啦,一次两次没有问题,久了多了可能问题就出来了一般用的是灭菌的双蒸水保证引物的终浓度就可以.都是用水稀释的,没啥差别

1两对半结果是大三阳（表面抗原,E抗原,核心抗体阳性）,说明几点：A已经感染乙肝B病毒复制相对活跃C传染性相对较强2你提供的第二个检查是血常规,一般白细胞和中性粒细胞正常其他问题不大3病毒DNA检测结

问题很多啊.或者是你的PCR仪需要进行荧光校准（如果其他探针也没有信号的话）,已经不能收集荧光信号了.或者是你的探针本身就有问题,合成的不好,信号很弱甚至没有信号.或者是你的探针存放时间太长,存放条件

1病毒检测结果说明乙肝病毒存在复制,但复制水平很低2两对半结果是小三阳（表面抗原,E抗体,核心抗体阳性）,说明几点：A已经感染乙肝B病毒复制相对静止C传染性相对较小3两个检测结果是相符的4病情情况和肝

引物不特异或者温度太低再问：我在质粒上做，峰图都很漂亮。引物BLAST也是很特异的，温度都设在58度，但是用基因组DNAP出来的峰就是杂乱无章，而且不管梯度稀释多少倍，峰图都没有显示出梯度来，崩溃了。

溶解曲线是在正常的PCR反应基础上加一个溶解曲线的反应条件,其中当温度由60℃升至95℃时,PCR仪每隔一定的温度检测一次信号.最后将收集的信号绘制出溶解曲线,然后将溶解曲线一次微分就会得到我们平时看

可以的,50bp到150bp都可以,只要你设计的引物探针特异性好,是可以做出来的；不过一般都是100bp-150bp左右比较好,我研究过中山达安公司09年的H1N1检测试剂盒,通过TA克隆得知,他们的

你要重新设计引物了有引物2具体有好几个峰,谁也不知道是哪个,是产物的话主要看溶解温度,溶解温度高一般是产物.建议重新设计引物,重做梯度PRC电泳分析.再问：懒得做电泳了，引物是没有问题的，因为是参考文

还是可以用的.不过现在SYBRGREEN的方法已经逐渐被淘汰了,建议换用probe-primer的方法.因为SYBRGREEN的结合是非特异性的,越长越容易出现错误.

1.按照正确的开关机顺序操作,有助于延长仪器的使用寿命,减少仪器出故障的频率.开机顺序：先开电脑,待电脑完全启动后再开启定量PCR仪主机,等主机面板上的绿灯亮后即可打开定量PCR的收集软件,进行实验.

PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针,该探针为一寡核苷酸,两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团.探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收；刚开始时,探针结合在DN

荧光定量PCR是通过荧光染料或荧光标记的特异性的探针,对PCR产物进行标记跟踪,实时在线监控反应过程,结合相应的软件可以对产物进行分析,计算待测样品的初始模版.