做琼脂糖凝胶电泳时发现,核酸染料和DNA向反方向移动：凝胶的前半部分呈荧光黄色,后半部分透明,why?

来源：学生作业帮编辑：作业帮分类：生物作业时间：2024/05/13 02:46:08

做琼脂糖凝胶电泳时发现,核酸染料和DNA向反方向移动：凝胶的前半部分呈荧光黄色,后半部分透明,why?
最近在做琼脂糖凝胶电泳时发现,核酸染料和DNA向反方向移动：凝胶的前半部分呈荧光黄色（见附图）,十分影响DNA条带的观察.且随着电泳时间的延长可以看到核酸染料向正极移动距离越大.不知道是gelview变质了（可能性不大,貌似突然之间出现的这种情况,本来用的好好的）还是因为电泳条件如电压、电泳时间等的问题.以前没有遇到过这种情况.十分着急,望大虾指导.

没看见附图,染料和条带当然会向正极移动.检查你的电源是否反插了,还有就是你重配下tae缓冲液.
再问：电极没有反插，DNA向正极移动。核算染料本来是应该均匀的分散在胶体中，可是发现核酸染料会随着电泳时间延长逐渐向负极迁移，靠近电源正极的一端比较透明无色，但是靠近负极的一端呈强荧光黄背景。如果电泳时间足够长会发现胶体的gelview染色全部会迁移到负极。附图传不上去，如果可以能否告诉我您的邮箱，我把附图发到您的邮箱里面。
再答：你好，就你发的图片来看，电泳确实有问题。染料给我的感觉还比较正常，毕竟还是能显带的，但带都很糊，而且点样孔附近的带感觉是跑不动，如果是酶切质粒之类的就不正常了。你用的是8孔的梳子，而且胶比较厚，是不是准备切胶的？是没点marker，还是marker没跑出来？你可以点个marker看看，如果marker都跑不好，结合你说电泳电流异常，我认为缓冲液有问题的可能性极大，此外，把胶重配下，一般DNA凝胶电泳实验可能犯的小错误包括：用水配胶，用tris-gly当电泳缓冲液，用琼脂粉当琼脂糖来配胶，电源反接。你可以逐个排除，再跑一次试试。祝大家的实验都顺利！

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