生化实验中的核酸大实验中的DNA和RNA提取和测定的一些问题

来源：学生作业帮编辑：作业帮分类：生物作业时间：2024/05/14 03:26:15

生化实验中的核酸大实验中的DNA和RNA提取和测定的一些问题
我们做的是鸡肝,正常情况下,DNA和RNA测出来的含量是多少啊?
还有一些思考题：1.除去脂质的操作中,乙醇,氯仿-甲醇,乙醚的加入顺序可以改变吗,原因.
2.RNA碱水解后,加入6mol/L和0.1mol/L的盐酸的作用分别是什么?
3.为什么要将分离后的RNA上清液稀释?
特别是第一个问题,想知道的详细点,

这样的如果你取样大概5mg,正常情况下,得出的DNA的产量大概400-600ng/ul（除非实验失败）.我一直用河南惠尔纳米科技的磁珠法核酸提取,方便快捷,简单迅速,效果很好,提取量也比较多.
第一个问题：核酸不溶于乙醇,所以可以使用乙醇对核酸进行漂洗,使残留的杂质溶解于乙醇,并最终通过离心去除.可总结为去除DNA中的残留杂质（对混杂的RNA无效）.如果你不用乙醇,会有很多杂质：盐、糖、蛋白等.
酚：使蛋白质变性溶解,抑制DNase的降解作用
氯仿：加速有机相与水相分层,去除核酸溶液中残余的酚
异戊醇：降低表面张力,减少气泡产生,使离心后的水相、变性蛋白相及有机溶剂相维持稳定
第二个问题：rna水解后,加盐酸可以和RNA水解后的核糖反应,生产一种化合物,这种化合物在670nm处有最大吸收峰,其吸收值和浓度成正比.加盐酸的作用就是为了定量.
第三个问题：取rna上清液稀释,应该也是便于测定吧.详情可以咨询河南惠尔的狄老师

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