原代肝细胞培养问题最近在分离原代肝细胞,用的是两步灌流法,就是先用灌流液,后用胶原酶灌流消化,然后用200目筛网过滤,5

来源：学生作业帮编辑：作业帮分类：生物作业时间：2024/05/11 01:54:28

原代肝细胞培养问题
最近在分离原代肝细胞,用的是两步灌流法,就是先用灌流液,后用胶原酶灌流消化,然后用200目筛网过滤,50g离心3min,之后用PBS洗3次,也是上面的转速和时间,得到下层的肝细胞,用培养液悬浮,接到6孔板里,然后就有浑浊的沉淀,那个沉淀是肝细胞吧?4个小时之后换液,请问这个时候肝细胞是不是已经贴壁了,我看到还是要多沉淀,也不知道是死细胞还是没贴壁的细胞,要多长时间才换液呢?

原代肝细胞很容易贴壁生长,4小时肯定能贴壁.
“然后就有浑浊的沉淀,那个沉淀是肝细胞吧?”将此沉淀用培养液或pbs稀释,加台盘蓝染色,显微镜下观察,若为活细胞,通常就是肝细胞了,要培养好,最好有大于85%以上的活性.
原代肝细胞最好生长在鼠尾胶原上,也就是用鼠尾胶原铺板,然后再普细胞.
4小时后换液,然后每20小时左右换液,通常原代肝细胞难以增值,但是维持20天左右没问题.

原代肝细胞培养问题最近在分离原代肝细胞,用的是两步灌流法,就是先用灌流液,后用胶原酶灌流消化,然后用200目筛网过滤,5 什么是康贝血液灌流器康贝血液灌流器是什么?做什么用的? 我要做小鼠肝细胞的原代培养,不知道采取哪种肝细胞分离方法好,希望给点建议, 大鼠原代肝细胞在高糖DMEM培养液中培养能否合成肝糖原? 求鼠肝细胞原代培养基成分心脏灌流实验额.是一个暑假大本营上的一个题.取新鲜猪或羊的心脏,对照人体心脏模型,辨认心脏上链接的血管.用去掉针头的注（2013•淮安模拟）某同学用新鲜的猪心脏做灌流，来模拟人的心脏实验．他将水从猪心脏的主动脉灌入．该同学观察到的实验现象培养第1代细胞与传10代以内的细胞统称为原代细胞培养原代培养. 在动物细胞培养中进行完成原代培养后为什么要进行传代培养? 细胞传代培养传代培养用的细胞也是来自机体组织吧.那跟原代的区别呢谢谢动物细胞培养中的细胞株和细胞系以及原代培养和传代培养该如何简单的理解?死抄概念者不理!用自己的话解释原代培养跟传代培养的区别