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高效液相 安捷伦 1200 用的柱子是 SB C-18 柱,3.0*50mm 测定EPA规定的16中PAH,紫外检测器,

来源：学生作业帮 编辑：作业帮 分类：物理作业 时间：2024/05/16 17:06:32
高效液相 安捷伦 1200 用的柱子是 SB C-18 柱,3.0*50mm 测定EPA规定的16中PAH,紫外检测器,求流动相比例
跪求流动线比例及分段时间,各位大侠啊·········998
我觉得你的柱子做16种PAH会有困难,肯定会有目标峰叠加分不开的情况.因为这16种里面有5组同分异构体.即使是C18,25cm的柱子,流动相条件也不好找,个别组的同分异构体想达到很好的分离度不容易.一些标准（比如GB）里提到用C18柱,但是我尝试过,而且是用25cm的,感觉分离（流动相）条件不大好实现.我建议你用Agilent PAH柱子,25cm的.分离还比较容易.流速1.2ml/min,流动相条件“0-5min,乙腈：水=50：50；27min,乙腈：水=80：20；36-41min,100%乙腈；43min-45min,乙腈：水=50：50.如果只用紫外检测器,我觉得你的检测限可能稍微有点偏高,仪器检测限应该在几百个ppb以上.如果用紫外检测器+荧光检测器效果会更好,标准品差不多可以跑到10个ppb甚至更低点.但是苊烯只能用紫外检测器,因为它的荧光很弱.如果你非要用你的柱子尝试,我建议你可以试试：1.乙腈水25：75等度,2.0ml/min的流速; 2.乙腈水40：60跑出来8-10个峰（具体几个峰你这柱子我不确定,而且你的标品的溶剂组成也不详.反正你看看哪两个峰之间间隔相对比较大,就在这个间隔的时间段里选择个时间改变流动相到下一个比例）,然后改为乙腈100%,至最后第二个峰出来,改为乙腈水40：60； 3.你可以尝试乙腈水40：60的等度看看,如果有峰间隔较长的情况,你再调整加大乙腈比例.
再问： 您说的间隔时间较长，缩短时间可以改变流动相，可是改变流动相整个梯度速率就发生变化了啊？我现在跑出来了15个峰，但是后面的两个峰是2ppm才出来的，也太大了，与前面的间隔时间也较长，前面是26min出来最后俩38min才出来,这个时间段流动相比例一直是50/50的。您看该怎么弄一下啊······把时间缩短，16个全跑出来·····？（我看官网他能跑出来16个的，但按照他那个比例我跑出来就是15个，浓度小了就12个峰）
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