作业帮请教大家有关HPLC检测样品的问题
来源：学生作业帮 编辑：作业帮 分类：生物作业 时间：2024/05/21 20:07:43
请教大家有关HPLC检测样品的问题
昨天用色谱仪检测样 品,但是在配制流动相时忘记调节缓冲盐溶液PH,大概在6-7 的范围内,走了一天的样品但峰不正常,今天早上又重新调节PH到2.2（SOP要求值）,用20%的甲醇冲洗色谱柱后,重新走样但是系统适用性溶液主峰推迟了14分钟,杂质峰也没有出现.我在想问题出在哪里.是否是之前未调节PH导致色谱柱的损坏呢?如果是如何采取补救措施?还有什么其他原因导致此种现象?（色谱柱填料：C18）HPLC的新手,做错了心里甚是忐忑那!希望得到您的指点!谢啦!
昨天用色谱仪检测样 品,但是在配制流动相时忘记调节缓冲盐溶液PH,大概在6-7 的范围内,走了一天的样品但峰不正常,今天早上又重新调节PH到2.2（SOP要求值）,用20%的甲醇冲洗色谱柱后,重新走样但是系统适用性溶液主峰推迟了14分钟,杂质峰也没有出现.我在想问题出在哪里.是否是之前未调节PH导致色谱柱的损坏呢?如果是如何采取补救措施?还有什么其他原因导致此种现象?（色谱柱填料：C18）HPLC的新手,做错了心里甚是忐忑那!希望得到您的指点!谢啦!
1．药品检验时标准品的制备在《中国药典》上应该都有规定的,如果是自己设计,那么标准品和样品的稀释倍数应该按照标准品和样品的峰面积大体在一个数量级来确定.但是样品峰面积值是标准品峰面积值大体一致最好.2．假如样品峰面积值是标准品峰面积值的一半（这种情况一般考虑为药品的实际含量偏低）但是还在同个数量级,也可以不需要调整稀释倍数.如果调整的话也是考虑增加样品的称样量.计算时把称取样品的实际重量代入公式.3．测定时样品峰面积和标准品峰面积大体一致,是为了减少相对误差.两者峰面积相差较大相对误差也变大.