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非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native-PAGE)应该注意哪些问题

来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:生物作业 时间:2024/05/13 02:48:00
非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native-PAGE)应该注意哪些问题
1.非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的过程中,蛋白质的迁移率不仅和蛋白质的等电点有关,还和蛋白质的分子量以及分子形状有关,其中蛋白质的等电点是最重要
的影响因子,要根据蛋白质的等电点来选择对应的电泳缓冲系统;
2.非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的过程中,要注意电压过高引起发热而导致蛋白质变性,所以最好在电泳槽外面放置冰块以降低温度;
3.蛋白质的分子量较大,则电泳时间可以适当延长,以使目的蛋白质有足够的迁移率和其它的蛋白质分开,反之亦然;
4.变性样品的离子强度不能太高(I