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绿色荧光蛋白基因的重组与表达实验流程图

来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:生物作业 时间:2024/05/07 08:34:51
绿色荧光蛋白基因的重组与表达实验流程图
急用,好的话还有加分
从含GFP基因的载体上酶切下GFP基因,比如pGFP载体,切胶回收GFP基因片段,再同样酶切你的表达载体(根据你想表达的物种选择不同载体),把回收的GFP基因同你酶切后纯化的表达载体放到一起,加T4连接酶连接过夜.再转化大肠杆菌.如果只是在大肠杆菌里做原核表达,就直接转化蛋白表达能力强的大肠杆菌菌株,比如BL21.如果是想在植物细胞或动物细胞里表达,利用菌落PCR筛选出真阳性菌株,再扩培阳性菌株,抽提质粒.植物的话,一般是再转到农杆菌里,利用农杆菌转染植株,使得GFP插入植株染色体,表达GFP蛋白.动物的话,一般是利用病毒载体,直接转染细胞.
再问: 已经解决了,不过还是谢谢你。