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细胞凋亡时用PI染料和药物阿霉素作用于细胞,都可以染细胞核DNA使之产生红色,如何将两者区分开

来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:生物作业 时间:2024/05/17 21:09:24
细胞凋亡时用PI染料和药物阿霉素作用于细胞,都可以染细胞核DNA使之产生红色,如何将两者区分开
阿霉素用蓝光激发产生绿色荧光,用绿光激发产生红色荧光
在做阿霉素对细胞的凋亡研究,用流式做细胞凋亡时用PI染色,PI染细胞核绿光激发后PI染细胞核会产生红色,而阿霉素若在此波长也产生红光,不能将两者区别开来,
绿色激光(535 nm左右)激发下,(1)阿霉素发射红色荧光,峰值在620 nm左右;(2)PI发射红色荧光,峰值在615 nm左右.两个发射光是重叠的,因此不能同时使用.
在蓝色激光(488 nm左右)激发下,(1)阿霉素发射荧光峰值在575 nm左右;(2)PI发射荧光峰值在515 nm左右,两者发射光有一定差距,但仍属于比较近的,做判断还是挺费劲的.不过可以试一试.
你查过相关的文献吗?在测阿霉素对细胞凋亡的影响时只能用PI检测吗?实在不行就换别的荧光探针检测