有别人构建好的含有目的基因的表达载体质粒,但是只知道目的基因的mRNA序列,如何做PCR检测目的基因?

来源：学生作业帮编辑：作业帮分类：生物作业时间：2024/05/18 18:52:17

第一个办法 ,如果你有这个载体的通用引物,可以用这俩通用引物做PCR,然后电泳观察条带的大小,如果条带和你的mRNA的大小相近（应该是略大于mRNA的,因为带有了小部分的载体序列）,那就说明这里边是插入目的基因的.
第二个办法,如果你能知道这个基因插入位点的酶切位点是什么的话,可以做双酶切来做鉴定,之后跑电泳看切出来的条带大小是否符合,注意如果切得完全的话应该是两条带,后边较大的是载体,前边的是你的mRNA.
如果没有通用引物但是有这个mRNA的两端引物,有人可以用这俩引物来PCR,但是这个方法不推荐,因为可能有没连接进去的rna污染会出现假阳性,因此一般还要配合酶切鉴定.

有别人构建好的含有目的基因的表达载体质粒,但是只知道目的基因的mRNA序列,如何做PCR检测目的基因? 我已经有含有目的基因的T质粒了,怎样构建表达载体啊? 可以用构建好的插入了目的基因的表达载体重组质粒做southern吗构建基因表达载体时,启动子终止子是如何设计加上去的?通常说用同一种酶切割质粒和目的基因,这样可以保证连接,但是目的基因前如何验证载体质粒的酶切位点已被切开?PCR产物（目的基因）被酶切开? 我有一段目的基因,需要构建表达载体,此时是扩增目的基因的全长还是? 为什么检测目的基因是否转录出mRNA用标记的目的基因做探针? 转基因第四步目的基因检测中的mRNA检测,分子杂交技术,用标记的目的基因做探针与mRNA杂交,基因如何与... 如何构建一个能高效表达目的基因的表达型载体在构建基因表达载体时候,怎么利用选择培养基鉴别是质粒—质粒,目的基因—目的基因,还是质粒—目的基因大家好,我现在做细胞实验开始需要构建目的基因的过表达,不知道应该选用慢病毒载体还是腺病毒载体,标书基因表达载体的构建与将目的基因导入受体细胞的区别?