测酸性蛋白酶时如何溶解酪蛋白?

来源：学生作业帮编辑：作业帮分类：生物作业时间：2024/05/14 13:23:50

测酸性蛋白酶时如何溶解酪蛋白?
小弟最近在用福林酚法测大曲中酸性蛋白酶活力,但用PH3.0乳酸-乳酸钠缓冲液配制1%酸性酪蛋白时,在沸水浴中始终不能完全溶解,在底部总有絮状沉淀.用该蛋白溶液进行水解后和空白液（1ml酶液+1ml三氯乙酸+所配1%酸性酪蛋白）在相同条件下离心显色,都显蓝色,在680nm条件下测吸光度也只有0.039,不在要求的0.2到0.4的范围之内.望各位大侠赐教.

我上学的时候做过这个实验,而且是我硕士论文的实验.
当时和你一样,怎么都溶解不完全,很抓头.
后来发现,为什么要让酪蛋白溶解完全呢?蛋白酶测定只要最后有酪蛋白被酶分解就可以显色了啊,溶解多少用多少呗.
于是,按照实验方法溶解了一些酪蛋白,然后离心,取上清做实验.结果很好.
不知道咱俩的情况是不是一样,参考一下吧
补充一下,你的最后OD是不是以三氯乙酸的做空白的?那么OD低有两种可能,第一,你测的酶确实不行,酶活太低；二,你的样品不纯,里边含有酪氨酸.我当时就遇到过第二种情况,导致OD极低

测酸性蛋白酶时如何溶解酪蛋白? 我要测蛋白酶的活性,文献上说用酪蛋白做底物为什么验证猪笼草分泌液中有蛋白酶时,用蛋白块而不是蛋白液酸性蛋白酶的提取方案? 请问怎么溶解酪蛋白请问下高手,能用小苏打溶解酷蛋白吗?还是有其它的办法溶解? 用福林酚法测定蛋白酶活性时,所用的酪蛋白哪里可以买?用干酪素（用于微生物培养基）可以吗? 蛋白酶K可以用来消化那些蛋白? 称取25mg蛋白酶配成25ml溶液,取2ml测得含蛋白氮0,2mg,另取0.1ml 测酶活力,结果每小时可以水解酪蛋白产酸性水解酪蛋白的英文缩写是什么福林酚法测蛋白我现在想测固定化木瓜蛋白酶的活性,底物是酪蛋白.原来溶解酪蛋白的缓冲液是磷酸缓冲液,但是这个缓冲液里的成分为什么尿素可以溶解蛋白酸性蛋白酶,酸性纤维素酶产品的特性,使用方法是什么,