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双酶切能够避免自连吗?

来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:综合作业 时间:2024/05/14 07:33:22
双酶切能够避免自连吗?
例如,用H、B两种限制酶切割质粒,得到H——B,当然H与B是不会连接的。但是会不会第二个DNA片段倒置后,再连接,产生H——B-B——H这样的自连?
黏性末端一般都是回文序列啊,两个B一样,当然也是会互补的啊?
ylgtwcat所述,自连还是会发生的。只不过与浓度有关。那这样看来,双酶切并不能避免自连,而有关“双酶切”可以避免自连的说法是错误的。
你说的这种情况确实会发生,我就遇到过.但是几率不会很高.如果加大浓度,连接的几率就大大提高.我曾经专门这样设计过实验呢.
不过切质粒后立刻跑胶,而不加连接酶,一般自连是很少见的.
“双酶切”可以避免自连的说法也不完全错.因为和一个酶相比,可能性大大降低了.我说的上面的实验是把两个片段提出来后,让他们自连,而不是让质粒的2端自连.