Trizol法提RNA,用DEPC水重溶RNA时,不能完全溶解,68摄氏度热溶,静置后下层仍浑浊,请问需要取上清吗?

来源：学生作业帮编辑：作业帮分类：物理作业时间：2024/05/27 03:56:41

你的情况可能有两种可能：1.像二楼说的那样,在用酒精洗完沉淀后,干燥过程时间太长,导致RNA不好溶解.但这种情况可像你那样在水浴中加热溶解个10min,一般是会溶的.所以你的问题看起来更像是第二种情况：2.剩下的不溶沉淀根本不是RNA,而是在提取过程中没有去干净的杂质或蛋白.这种东西是不会溶的.而且有时不会影响RNA的质量,瞬时离心一下把沉淀甩到管底,吸上面的清液就行了；但如果提取过程中RNA发生了降解,这时即便是上面的上清液也是不能用的了.你可以先用上面的上清液跑个胶看看完整性如何.如果两条或三条带就不妨碍使用.祝顺利!
再问：呵谢谢啦，之前我已经做过了对比实验，跟你说的一样，取上清即可，跑出的条带也是完整的。现在头痛的是反转录后，用目的引物梯度PCR，一直没有任何条带，换了好几次PCR体系也仍无结果。由于刚接触基因，对很多东西都是刚刚学起，曾一度怀疑是自己操作的问题，可是试了很多次都以失败而告终，都快崩溃了。老师说引物没有问题，模板也排除了，反应体系里面的原因也没找到，我想紫外检测下引物的OD值，看是否有引物，这样可行吗？

Trizol法提RNA,用DEPC水重溶RNA时,不能完全溶解,68摄氏度热溶,静置后下层仍浑浊,请问需要取上清吗? Trizol法提总RNA时氯仿的作用? 提取RNA,用depc水溶解4度一般要多长时间我近几日一直在提RNA,用的是新鲜组织,液氮研磨,EP,枪头都用DEPC泡了,用的TRIZOL提取,整个操作时间也请问你是如何解决trizol法提RNA中的DNA污染? 做实时荧光定量PCR时,模板RNA用什么溶解比较好TE还是dd水还是灭菌的DEPC水 Trizol法提取RNA/DNA 提RNA时枪头盒子有必要用DEPC水泡吗? 求TRIZOL提取RNA的详细步骤有关RNA提取的问题用TRIZOL提取RNA时,为什么每次都要在冰上孵育一会,常温下不行吗? RNA提取请问TRIZOL 是某一个外国公司生产的RNA提取试剂定名为TRIZOL试剂盒还是一种提取方法? DEPC是如何抑制RNA酶的