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我是新手,要做Xbal和XhoI双酶切实验,想请问一下buffer建议中2XTango是什么意思啊?

来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:英语作业 时间:2024/05/23 20:31:59
我是新手,要做Xbal和XhoI双酶切实验,想请问一下buffer建议中2XTango是什么意思啊?
有没有哪位前辈能告知这两种酶的酶切反应体系,
登录到fermentas的网站上最上方,在tool部分有一个Doubledigest的工具,点击点击进去以后,把你要切的两个酶勾上,提交,就会给出相应的buffer的建议.
We recommend:
Buffer 2X Tango™
2-fold excess of XbaI
XhoI
Incubate at 37°C

而且还可以看到每一种酶在此buffer中的活性,由于XbaI在2XTango中活性是50-100%,所以建议用2倍的XbaI. 另外,一定要注意XbaI是否有甲基化.
再问: 您的回答中Buffer 2X Tango™这一列中2X Tango™表示的是什么,怎么得到呢?
再答:   商标名,具体含义不清楚。
再问: 上述中2倍的XbaI其中2倍是相对于什么含量而定的呢?
再答:   你应该知道限制性内切酶活性单位的定义吧。知道活性单位的定义,你就可以根据所加DNA的量计算出需要多少限制性内切酶,这就是所谓1倍的酶量。   不过在实际操作中,很少有人会计算限制性内切酶的量,通常都是按照方便的体积加,比如1微升、0.5微升等。所以你不需要太纠结这些细节。