原核基因在大肠中表达存在密码子偏爱性吗?

来源：学生作业帮编辑：作业帮分类：生物作业时间：2024/05/29 02:49:20

原核基因在大肠中表达存在密码子偏爱性吗?
我在做芽孢杆菌一个蛋白的异源表达,基因克隆了,用的pET-28a,表达菌株是BL21(DE3)pLysS,测序也没有问题,25℃、30℃、37℃都诱导了,IPTG为0.5mM.可就是不见表达,所以我在考虑是不是因为稀有密码子的问题,

是的原核表达这是个很重要的问题如果你的基因ORF中存在稀有密码子会严重影响表达尤其是Arg(AGG,AGA,CGA);Leu(CTA);ILe(ATA);Pro(CCC).当然重复存在更增加了表达的难度.
如果你的稀有密码子比例不是很大可以用Rosetta菌株试试它补充了一定的大肠杆菌稀有密码子
但是如果比例很大就不可以了考虑自己合成基因好了
我的片段就是含40%稀有密码子检测组蛋白有表达信号但是基因不表达
再问：谢谢你！我是在线分析的，表明稀有密码子是分散在目的基因中，基因全长2700bp左右，稀有密码子不到20个，没有串联。我之前一直以为只有做真核基因的表达才会涉及密码子偏爱性问题，我做的原核基因，由于一直没有表达所以我采开始怀疑是这里出了问题。像我这种情况，用Rosetta感受态ok吗？
再答：应该是的稀有比例不是很大但是不能说一定可以你可以用来试试实验嘛还有就是你看下说明并不是补充所有的稀有密码子的希望你的会在菌株中有所补充做原核表达还是很说不好的东西如果没有表达那原因就多了

原核基因在大肠中表达存在密码子偏爱性吗? pet载体原核表达基因的终止密码子要加吗如何在NCBI中查基因密码子偏好性原核生物DNA上不存在密码子,密码子只存在于mRNAS上? 细胞中的基因在表达时,先转录形成信使RNA,信使RNA中能决定氨基酸的密码子在基因指导蛋白质合成的过程中,密码子位于原核生物基因的编码区不存在非编码序列吗?难道没有终止密码子吗请说明在原核细胞中表达真核基因,合成真核蛋白存在的主要问题. 基因中编码区转录后形成mRNA上的第一个密码子一定是起始密码子吗如果不是起始密码子之前的密码子不翻译吗基因表达载体中含有启动子和密码子.这句话是错的.哪里错... 1.、“肿瘤细胞中存在着显形作用的癌基因,在正常细胞中有与之同源的正常基因,被称为原癌基因 ” 2.“原癌目的基因上游引物中引入了终止密码,而原核表达载体上有ATG,这样我的目的基因能被表达出来吗?