作业帮免疫组化的非特异性染色
来源：学生作业帮 编辑：作业帮 分类：综合作业 时间：2024/04/30 15:42:18
免疫组化的非特异性染色
请教大侠些：我做了好多次免疫组化了,每次做8张片子,2组抗体,一组抑癌基因基本没什么表达,但是另一组癌基因SKP2总是出现强烈的非特异性染色,怎么避免呢?求指教,
封闭时间不短啊，一般都是山羊血清20分钟。可能与片子不新鲜有关系，难道在脱钠脱水时会有交叉污染？楼下的兄弟能给出你的操作步骤吗？
请教大侠些：我做了好多次免疫组化了,每次做8张片子,2组抗体,一组抑癌基因基本没什么表达,但是另一组癌基因SKP2总是出现强烈的非特异性染色,怎么避免呢?求指教,
封闭时间不短啊，一般都是山羊血清20分钟。可能与片子不新鲜有关系，难道在脱钠脱水时会有交叉污染？楼下的兄弟能给出你的操作步骤吗？
如果你的片子和操作过程都是一样,而一组没信号、另一组却有信号,那出现差异的原因就应该是一抗的反应过程（不知你的显色过程是怎样的）；而你要是能确定看到的结果不是基因表达的实际情况,即你所说的非特异染色,那就应该是抗体的原因,单就非特异染色而言,可能是你的抗体稀释度不够,可以尝试倍增稀释比,最好是查询使用与你用相同抗体的相关文献的稀释比,或直接咨询公司的技术支持；另外一个原因可能是你的抗体不好使,由于你的另一组抗体没有提供阳性信号,致使你的体系没有可靠的对照,建议你选择一个阳性对照,比如肿瘤中常用的ki67,这样可以知道你的操作步骤是否存在问题.