感受态细胞有沉淀BL21制备感受态细胞,用CaCl2/15%甘油悬浮后,-20度保存,发现底部有沉淀.转化质粒时,37度

来源：学生作业帮编辑：作业帮分类：生物作业时间：2024/05/13 03:47:48

感受态细胞有沉淀
BL21制备感受态细胞,用CaCl2/15%甘油悬浮后,-20度保存,发现底部有沉淀.转化质粒时,37度复苏细胞1h后,在EP管底部有絮团状沉淀.(转化质粒失败)
这两种沉淀正常么?是什么原因造成的?

一般保存是在-80摄氏度,-20度可以放一段时间,但不能太长.底部有沉淀正常,甘油只是悬浮菌体,而不能溶解,久了就会沉淀下来!转化质粒失败是其他原因,最大可能性是感受态无活性,建议重做感受态,及做即用,效果最好,剩下放置于-80度,甘油可20%.

感受态细胞有沉淀BL21制备感受态细胞,用CaCl2/15%甘油悬浮后,-20度保存,发现底部有沉淀.转化质粒时,37度用Cacl2制备感受态时,第一次加Cacl2后未悬浮细胞, 制备感受态细胞时为什么质粒浓度不能过高感受态细胞怎样制备感受态细胞可不可以用液氮保存制作大肠杆菌感受态细胞时,最后保存细胞时用甘油好呢?还是用DMSO好呢 BJ5183细胞感受态的制备影响感受态细胞转化效率的因素有哪些质粒载体倒入原核细胞时为什么要将细胞制备成感受态大肠杆菌感受态细胞制备时的CaCl2浓度到底是多少呢? 表达型大肠杆菌BL21（DE3）PLySs感受态细胞转化培养大肠杆菌感受态细胞制备试验中为什么转化后要在37℃摇床上温育45min