作业帮PDA培养基中沉淀物很多,怎么处理,真菌生长一半,看试管后面发黑.
来源：学生作业帮 编辑：作业帮 分类：生物作业 时间：2024/05/24 14:48:34
PDA培养基中沉淀物很多,怎么处理,真菌生长一半,看试管后面发黑.
在制作真菌试管的时候,沉淀物过多,用滤网过了3次也不行,用10层纱布代替也不行,总是有沉淀物.
做好的PDA培养基,放入真菌后,真菌生长一半的时候观看试管斜面体后面,发黑.请问高人怎么解决.
我是做食用菌母种用的 如果有能代替的配方也可以请详加说明
我说的是所有的菌种都会出这样的情况，指的是高温灭菌的后，接种后，接菌点背后发黑，还有下面的人说10分钟应该说的是制作前期10分钟，但是不能灭菌时间也10分钟吧。
在制作真菌试管的时候,沉淀物过多,用滤网过了3次也不行,用10层纱布代替也不行,总是有沉淀物.
做好的PDA培养基,放入真菌后,真菌生长一半的时候观看试管斜面体后面,发黑.请问高人怎么解决.
我是做食用菌母种用的 如果有能代替的配方也可以请详加说明
我说的是所有的菌种都会出这样的情况，指的是高温灭菌的后，接种后，接菌点背后发黑，还有下面的人说10分钟应该说的是制作前期10分钟，但是不能灭菌时间也10分钟吧。
PDA培养基沉淀的问题已经困扰大家很多年的.
原因:
做个显微镜检就很容易发现,PDA培养基沉淀物来自马铃薯和琼脂的植物细胞.
解决方案:
马铃薯煮汁经过速冻结冰后再解冻时,汤汁中的薯细胞会聚成棉絮状沉淀.经过滤即可得基本无沉淀的澄清薯汁.
具体流程:
按常规将马铃薯细切成黄豆粒大,计量加水煮沸20分钟,用一层粗纱布或网纱过滤,待60℃左右时装在清洁的废矿泉水塑胶瓶内盖紧,冷却后置冰箱冷冻室内一昼夜.用时取出在室温中或用自来水冲浸解冻,不可加热）,即可见到凝聚沉淀,然后用密细布或滤纸过滤,过滤时不可用力摇震以免分散沉淀影响效果,滤汁补足.
这是97年《食用菌》上一篇paper介绍的方法,很好用.
发黑:
碳源和氮源混匀后再高温灭菌,某些情况下,羟基和氨基会发生缩合反应,使培养基黑化.
解决方法:
碳源 氮源 分开灭菌,再无菌混合.
补充:,糖在高温下是会焦化的,如果碳源单独灭菌,仍然会发黑,那就请注意下温度是不是太高了,时间是不是太长了,以及葡萄糖的浓度是不是太高了,一般2%就可以了.
我做的时候是115度,10分钟.
原因:
做个显微镜检就很容易发现,PDA培养基沉淀物来自马铃薯和琼脂的植物细胞.
解决方案:
马铃薯煮汁经过速冻结冰后再解冻时,汤汁中的薯细胞会聚成棉絮状沉淀.经过滤即可得基本无沉淀的澄清薯汁.
具体流程:
按常规将马铃薯细切成黄豆粒大,计量加水煮沸20分钟,用一层粗纱布或网纱过滤,待60℃左右时装在清洁的废矿泉水塑胶瓶内盖紧,冷却后置冰箱冷冻室内一昼夜.用时取出在室温中或用自来水冲浸解冻,不可加热）,即可见到凝聚沉淀,然后用密细布或滤纸过滤,过滤时不可用力摇震以免分散沉淀影响效果,滤汁补足.
这是97年《食用菌》上一篇paper介绍的方法,很好用.
发黑:
碳源和氮源混匀后再高温灭菌,某些情况下,羟基和氨基会发生缩合反应,使培养基黑化.
解决方法:
碳源 氮源 分开灭菌,再无菌混合.
补充:,糖在高温下是会焦化的,如果碳源单独灭菌,仍然会发黑,那就请注意下温度是不是太高了,时间是不是太长了,以及葡萄糖的浓度是不是太高了,一般2%就可以了.
我做的时候是115度,10分钟.
PDA培养基中沉淀物很多,怎么处理,真菌生长一半,看试管后面发黑.
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