利用末端终止法测定DNA序列需要的成分有

来源：学生作业帮编辑：作业帮分类：生物作业时间：2024/05/11 16:19:47

利用末端终止法测定DNA序列需要的成分有
是dNTP还是ddNTP.

ddNTP是双脱氧核苷酸
双脱氧核苷酸末端终止法简称为Sanger法或末端终止法,该技术的高明之处在于引入了双脱氧核苷三磷酸（2',3'ddTBP）作为链终止剂.与普通dNTP不同的是2',3'ddNTP在脱氧核糖的3' 位置缺少一个羟基,所以,虽然它可以在DNA聚合酶作用下通过其5' 三磷酸基团掺入到正在增长的DNA链中,但由于缺乏3'羟基,2',3'ddNTP无法同后续的dNTP形成磷酸二酯链,于是,DNA链的合成嘎然而止.如果在DNA合成体系的4种普通dNTP中加入少量的一种ddNTP,链延伸将与偶然发生但却高度特异的链终止展开竞争,结果就形成了一系列长短不一的核苷酸链,其长度取决于从用以起始DNA合成的引物末端到出现过早链终止的位置之间的距离.在4组独立的DNA合成体系中分别采用4种不同的ddNTP,就可以产生4组寡核苷酸,每组将产生以一种特异性的ddNTP为末端的不同长度的核苷酸链.经PAGE电泳分离和放射自显影,即可读出被测定的DNA的全部顺序.

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