作业帮植物DNA提取,分析结果时老师说有降解严重!
来源：学生作业帮 编辑：作业帮 分类：生物作业 时间：2024/05/21 12:45:53
植物DNA提取,分析结果时老师说有降解严重!
材料是取的新鲜材料,-20冷冻过夜的
100V电泳跑了两个小时,胶是1.2%的,会不会与这有关?
材料是取的新鲜材料,-20冷冻过夜的
100V电泳跑了两个小时,胶是1.2%的,会不会与这有关?
不知道你提的这个DNA样品用RNase处理过没有?
如果没有处理过的话,可能你的样品里有大量的RNA存在,显得电泳拖尾,不一定是你的DNA降解严重.另外,电泳图中没有看到明显的DNA条带存在,可能的原因是：1.DNA真的降解了；2.最后提取出来的DNA溶液里DNA浓度太低.
如果你用RNase处理过了,那么能够说明你的DNA降解的厉害.那最好使用新鲜的组织,-80度保存的组织也好,不要-20度保存的.
再问： 没用RNase处理~~~不知道RNase的配方~~~ 还有，-20保存的和-80的有什么不同？
再答： 提基因组鉴定，0.7%-1%的浓度的胶就够了，不知道你的电泳槽是多长的？电压大约5V/cm，20-30分钟就足够了。 试剂公司有卖RNase的，浓度可能是10mg/ml的，在研磨消化过程或者是抽提一次之后加入适量的RNase，消化个把小时就可以了。或者你在提取出来DNA之后加入RNase消化，然后重新沉淀DNA。得根据沉淀的量来加适量的溶液溶解。 假定材料很新鲜，一般的提取DNA的过程，我觉得各项操作对DNA的降解影响不是很大，尽量温和点操作。 -80度保存的组织比-20度保存的组织新鲜的多，蛋白、DNA、RNA被破坏的程度很低。
再问： RNase酶准备的有，也就是不知道加多少好，这个再看看…… 比较关键的是现在没有-80的条件，听说4度的保鲜不错，但不知道研磨的话情况会怎么样~~~~想问下怎样研磨比较好，尽可能的降低降解率
再答： 对于植物来说，4度保鲜估计会挺好的。要想研磨的好的话，加液氮研磨比较好。 操作尽量温和一点，通常研磨和震荡溶液的力量会使DNA断裂。
如果没有处理过的话,可能你的样品里有大量的RNA存在,显得电泳拖尾,不一定是你的DNA降解严重.另外,电泳图中没有看到明显的DNA条带存在,可能的原因是：1.DNA真的降解了；2.最后提取出来的DNA溶液里DNA浓度太低.
如果你用RNase处理过了,那么能够说明你的DNA降解的厉害.那最好使用新鲜的组织,-80度保存的组织也好,不要-20度保存的.
再问： 没用RNase处理~~~不知道RNase的配方~~~ 还有，-20保存的和-80的有什么不同？
再答： 提基因组鉴定，0.7%-1%的浓度的胶就够了，不知道你的电泳槽是多长的？电压大约5V/cm，20-30分钟就足够了。 试剂公司有卖RNase的，浓度可能是10mg/ml的，在研磨消化过程或者是抽提一次之后加入适量的RNase，消化个把小时就可以了。或者你在提取出来DNA之后加入RNase消化，然后重新沉淀DNA。得根据沉淀的量来加适量的溶液溶解。 假定材料很新鲜，一般的提取DNA的过程，我觉得各项操作对DNA的降解影响不是很大，尽量温和点操作。 -80度保存的组织比-20度保存的组织新鲜的多，蛋白、DNA、RNA被破坏的程度很低。
再问： RNase酶准备的有，也就是不知道加多少好，这个再看看…… 比较关键的是现在没有-80的条件，听说4度的保鲜不错，但不知道研磨的话情况会怎么样~~~~想问下怎样研磨比较好，尽可能的降低降解率
再答： 对于植物来说，4度保鲜估计会挺好的。要想研磨的好的话，加液氮研磨比较好。 操作尽量温和一点，通常研磨和震荡溶液的力量会使DNA断裂。
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