HPLC的仪器检出限和定量限

来源：学生作业帮编辑：作业帮分类：生物作业时间：2024/04/29 12:40:19

HPLC的仪器检出限和定量限
在用HPLC测样时,标样4mg/L连续进样10次,以峰面积的标准偏差比上标准曲线的斜率再乘以3,就是所谓3倍信噪比计算的仪器检出限吗?乘以10就是仪器定量限?

这样做是不正确的!
首先：峰面积的标准偏差和斜率与基线噪音没有必然的联系!例如对于同一个样品,影响标准偏差的不光是仪器的检测器,还有色谱柱和进样阀,柱压的稳定性等很多因素.斜率就更谈不上了.
再者：即使标准偏差、斜率和极限噪音有关系,但大部分样品在检测限浓度的时候并不符合标准曲线.
最后：检测限和定量限是以极限噪音（峰高）为基准而不是峰面积,所以以峰面积的标准曲线计算检测限和定量限的方法是不正确的.也是不严谨的.
现在国家药监局审评中心要求的正确的做法是：
将样品不断稀释,例如你4mg/L（4ug/ml）的样品稀释10倍、20倍、50倍、100倍.分别进样,如果稀释20倍的样品信噪比在定量限（或检测限）附近（例如信噪比是15:1）,则将原溶液稀释25倍（或30倍）,直到其信噪比符合定量限（或检测限）的信噪比要求为止.当然,自动进样器也可以通过改变进样量来使信噪比达到要求（这是偷懒的做法）.然后再根据进样浓度和进样量来计算检测限和定量限.
定量限和检测限对信噪比的要求不是非常的严格,只是说“大约”在10:1和3:1附近,如果你做的是11:1和3.2 :1,那也是正确的.
当固定进样量的时候,检测限和定量限也可以用浓度来表示（ug/ml、ng/ml、pg/ml等,但通常是用质量（例如,ug、ng、pg等）来表示的.

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