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1 用PCR仪扩增细胞的DNA,所用的试剂和样品是什么?其循环条件是什么?

来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:生物作业 时间:2024/05/03 03:44:45
1 用PCR仪扩增细胞的DNA,所用的试剂和样品是什么?其循环条件是什么?
样品 可以用细胞 也可以用细胞里提取的DNA
试剂 DNA聚合酶(依赖于你的目的选择普通Taq酶还是高保真Taq酶)
DNA聚合酶附带的缓冲液,MgCl2(可能有可能没有,没有的一般是公司添加到额缓冲液里了)
dNTP:四种脱氧核糖核苷酸
无菌水
循环条件:95℃ 10min
95℃ 30sec
55℃(取决于你的引物的退火温度,可以用梯度PCR摸索) 30sec total 25~35 cycle
72℃ 60sec(时间取决于你的酶的扩增效率与要扩增片段的长度,酶的说明书上有)
72℃ 10min
4℃ hold