western blot 中,前面跑胶加热蛋白变性了,为什么后面还能跟抗体特异性结合.
来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:综合作业 时间:2024/05/08 23:40:31
western blot 中,前面跑胶加热蛋白变性了,为什么后面还能跟抗体特异性结合.
变性是某些构象和结构发生改变,决定抗体抗原结合的是抗原上的抗原决定簇.抗原决定簇是由6-12氨基酸或碳水基团组成,它可以是由连续序列(蛋白质一级结构)组成或由不连续的蛋白质三维结构组成.
在WB中抗体结合在抗原决定簇上.抗原决定簇有线性的也有非线性的(即有三维结构).也就是说并不是所有抗体都可以用来做WB,有些抗体与抗原的结合位点在抗原的线性决定簇上或者不受自身变性影响,这些抗体就可以用来做WB.而有些抗体结合的位点随着蛋白的变性,就不能结合到抗原上.
仔细看下抗体的说明书你就会发现每个抗体在各个实验方法中(WB,免疫荧光,免疫组化,流式细胞等)的适用范围是不一样的.
在WB中抗体结合在抗原决定簇上.抗原决定簇有线性的也有非线性的(即有三维结构).也就是说并不是所有抗体都可以用来做WB,有些抗体与抗原的结合位点在抗原的线性决定簇上或者不受自身变性影响,这些抗体就可以用来做WB.而有些抗体结合的位点随着蛋白的变性,就不能结合到抗原上.
仔细看下抗体的说明书你就会发现每个抗体在各个实验方法中(WB,免疫荧光,免疫组化,流式细胞等)的适用范围是不一样的.
western blot 中,前面跑胶加热蛋白变性了,为什么后面还能跟抗体特异性结合.
western blot里面蛋白变性,那么这样的蛋白失去了活性,为什么还能和抗体蛋白结合?
Western Blot 抽提蛋白煮沸变性后,-20度保存,隔天出现沉淀,为什么?
教各位大侠,在蛋白纯化时,MBP-目的蛋白融合蛋白在变性之后还能结合上MBP抗体的beads吗?
为什么同样的蛋白在两次western blot检测中蛋白量相差那么大啊?
western blot 蛋白质为什么要加热
做western blot时为什么转膜后膜上没有蛋白?
western blot 实验中组织提取蛋白最小量多少
Western-blot实验中,蛋白上样一般多少含量
western blot 中在转膜之后为什么要进行封闭啊?据说是为了防止抗体的非特异行结合,这里的非特异性结合指的是什么
无氧呼吸产生乳酸和抗原与抗体的特异性结合都发生在内环境中,为什么错了?
western-blot中蛋白量就等于蛋白灰度值乘以上样量除以内参灰度值?