TrKA跨膜蛋白在BV2上的表达,想先用免疫细胞化学或者免疫荧光定位,可是不知道选择哪个好,高手指导一下哦
来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:综合作业 时间:2024/05/14 12:46:09
TrKA跨膜蛋白在BV2上的表达,想先用免疫细胞化学或者免疫荧光定位,可是不知道选择哪个好,高手指导一下哦
荧光的灵敏度要高很多
再问: 我要看的是跨膜蛋白,是一个膜上的受体,实验室的师兄说可能要是表达量很少的话用荧光显微镜分辨率不是很好,要用共聚焦显微镜,可是我们实验室没有共聚焦显微镜,我看文献上面用免疫荧光的也有,可是大部分还是用的免疫组化,很矛盾,不知道用哪个,您能具体的给我介绍一下他俩的优缺点吗?
再答: 主要区别就是敏感度。其他都是一样的。如果文献有报道,你先照着做。不过既然是已知的跨膜蛋白,除非你是要研究跨膜分布的变化,不然只看有没有的话,不一定非要共聚焦不可的
再问: 太感谢了,要用免疫荧光的话,是在孔板上直接做比较好还是把玻片放孔板里做呢?还有要是有直接带荧光的抗体是不是用直接荧光比间接的要好呢?怎么选择直接荧光和间接荧光呢?谢谢
再答: 放在哪里做看个人习惯了。不必强求。 如果只是一种抗原,其他的共染色不是抗体,建议用间接的,这样信号可以得到放大。如果有2种以上的抗体,还是用直接的好些,避免在选二抗的时候遇到麻烦
再问: 我要看的是跨膜蛋白,是一个膜上的受体,实验室的师兄说可能要是表达量很少的话用荧光显微镜分辨率不是很好,要用共聚焦显微镜,可是我们实验室没有共聚焦显微镜,我看文献上面用免疫荧光的也有,可是大部分还是用的免疫组化,很矛盾,不知道用哪个,您能具体的给我介绍一下他俩的优缺点吗?
再答: 主要区别就是敏感度。其他都是一样的。如果文献有报道,你先照着做。不过既然是已知的跨膜蛋白,除非你是要研究跨膜分布的变化,不然只看有没有的话,不一定非要共聚焦不可的
再问: 太感谢了,要用免疫荧光的话,是在孔板上直接做比较好还是把玻片放孔板里做呢?还有要是有直接带荧光的抗体是不是用直接荧光比间接的要好呢?怎么选择直接荧光和间接荧光呢?谢谢
再答: 放在哪里做看个人习惯了。不必强求。 如果只是一种抗原,其他的共染色不是抗体,建议用间接的,这样信号可以得到放大。如果有2种以上的抗体,还是用直接的好些,避免在选二抗的时候遇到麻烦
TrKA跨膜蛋白在BV2上的表达,想先用免疫细胞化学或者免疫荧光定位,可是不知道选择哪个好,高手指导一下哦
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