微生物分离和纯培养技术有哪些?

微生物分离和纯培养技术有哪些?

微生物的培养方式
1．分批培养（batchculture）将微生物置于一定容积的培养基中,经培养,最后一次收获,谓分批培养.在分批培养中,培养基一次加入,不予补充,不再更换.由于营养消耗,代谢产物积累,对数生长期不能长期维持.
2．连续培养（continuous culture）在培养器中不断补充新鲜营养物质,并不断排出部分培养物（包括菌体和代谢产物）,以保持长时间生长状态的一种培养方式.主要有恒浊连续培养和恒化连续培养两类.恒浊连续培养通过不断调节流速,使培养液浊度保持恒定,因而可不断提供具有一定生理状态的细胞,并可得到以最高生长速率进行生长的培养物.恒化连续培养通过控制恒定的流速使营养物浓度基本恒定,从而使微生物保持恒定的生长速率.用不同浓度的限制性营养物进行恒化培养,可得到不同生长速率的培养物.
3．半连续培养（semi-continuous culture）在发酵罐中的一部分发酵液保留下来作为菌种液,放出其余部分进入提练加工工序,在剩余的培养液中加满新的未接种的培养液,继续培养,如此反复,谓之半连续培养.
4．补料分批培养（fed-batch culture）补料分批培养又称半分批培养,是指在分批培养过程中,间歇或连续地补加新鲜培养液,但不取出培养物.待培养到适当时期,将其从反应器中放出,从中提取目的生成物（菌体或代谢产物）.若放出大部分培养物后,继续进行补料培养,如此反复进行,则称为重复补料分批培养（repeated fed-batch culture）.与传统分批发酵相比,补料分批发酵的优点在于使发酵系统中的基质浓度维持在低水平,这有以下优点：①可除去快速利用碳源的阻遏效应,并维持适当的菌体浓度,以减轻供氧矛盾；②避免有毒代谢物的抑菌作用；③大为减少了无菌操作要求十分严格的接种的次数.与连续发酵相比,补料分批培养不会产生菌种老化和变异等问题.故其应用范围十分广泛.
5．同步培养 能使培养的微生物处于较一致的,生长发育在同一阶段上的培养方法叫同步培养法.利用同步培养法控制细胞的生长,使它们处于同一生长阶段,所有细胞都能同时分裂,这种生长方式叫同步生长（图3—4）.用同步培养法得到的培养物叫同步培养物（synchronous culture）.这样,群体和个体行为一致,即可用研究群体的方法来研究个体水平上的问题.由于同步群体的个体差异,同步生长往往最多维持2个～3个世代,然后又逐步变为随机生长.
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