作业帮miRNA靶标验证实验中,将预测靶标的3'UTR插入PGL3-control时怎样选择酶切位点
来源：学生作业帮 编辑：作业帮 分类：语文作业 时间：2024/05/19 10:38:46
miRNA靶标验证实验中,将预测靶标的3'UTR插入PGL3-control时怎样选择酶切位点
我在做miRNA的靶标验证实验,想把预测靶标的3'UTR构建至PGL3-control载体中,我发现在荧光素酶基因下游只有XbaI酶切位点,之后还有一个HpaI,但位于SV40 late poly(A) signal 中,那这个HpaI是不是不能用呢?难道只能用单酶切吗?SV40 late poly(A) signal 是说SV40的复制终点吗?我要插入的3'UTR区是不是只能插在SV40 late poly(A) signal 之前?
我在做miRNA的靶标验证实验,想把预测靶标的3'UTR构建至PGL3-control载体中,我发现在荧光素酶基因下游只有XbaI酶切位点,之后还有一个HpaI,但位于SV40 late poly(A) signal 中,那这个HpaI是不是不能用呢?难道只能用单酶切吗?SV40 late poly(A) signal 是说SV40的复制终点吗?我要插入的3'UTR区是不是只能插在SV40 late poly(A) signal 之前?
应该是吧.polyA是II型转录酶的转录终止信号,3’-UTR应该是在polyA之前.
一个酶切位点也不错,你正好可以考察一下3‘UTR正反向插入,mirna对其识别、作用的效果.
一个酶切位点也不错,你正好可以考察一下3‘UTR正反向插入,mirna对其识别、作用的效果.
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