作业帮请你帮我优化HPLC的色谱条件
来源：学生作业帮 编辑：作业帮 分类：综合作业 时间：2024/05/11 02:50:05
请你帮我优化HPLC的色谱条件
反向高效液相色谱测定盐酸多柔比星的含量
样品浓度：100ug/ml
流动相：十二烷基硫酸钠（1.11g加0.68ml磷酸加500ml双蒸水）：乙腈：甲醇=500:500:60
进样量：10ul
流速：0.7ml/min
波长：254nm
之前流速为1.0ml/min,杂质峰与主峰分离度为2.273,出峰时间约11.5min,流速改为0.7后,分离度为2.832,出峰时间约11.6min
请您帮我调节一下配比等以上条件,使峰型,分离度更好（样品呈酸性,需再加什么试剂）
反向高效液相色谱测定盐酸多柔比星的含量
样品浓度：100ug/ml
流动相：十二烷基硫酸钠（1.11g加0.68ml磷酸加500ml双蒸水）：乙腈：甲醇=500:500:60
进样量：10ul
流速：0.7ml/min
波长：254nm
之前流速为1.0ml/min,杂质峰与主峰分离度为2.273,出峰时间约11.5min,流速改为0.7后,分离度为2.832,出峰时间约11.6min
请您帮我调节一下配比等以上条件,使峰型,分离度更好（样品呈酸性,需再加什么试剂）
首先：在你当前色谱条件下,想提高分离度,可以从以下几方面入手
1.1>调高离子强度,降低缓冲液PH值.例如将磷酸的用量提高.假如你现在流动相PH至为4.0,则通过调高磷酸用量将PH调至3.5.2010版药典要求加1.44g和0.68ml,你可以试试加1.50g和0.8ml.（这个过程要注意缓冲液的PH值,不能低于色谱柱下限）
1.2>提高缓冲液的比例,例如将500:500:60改成600:500:60
1.3>更换高效色谱柱永远是最快最简单的办法.
1.4>如果你不怕麻烦的话,可以自己摸索以下梯度洗脱,这个太麻烦.
第二：你可以用USP35或EP7.0的色谱条件试试.
第三：中国药典2010版中明确要求十二烷基硫酸钠的加入量是1.44g,你为何要改为1.11g?
1.1>调高离子强度,降低缓冲液PH值.例如将磷酸的用量提高.假如你现在流动相PH至为4.0,则通过调高磷酸用量将PH调至3.5.2010版药典要求加1.44g和0.68ml,你可以试试加1.50g和0.8ml.（这个过程要注意缓冲液的PH值,不能低于色谱柱下限）
1.2>提高缓冲液的比例,例如将500:500:60改成600:500:60
1.3>更换高效色谱柱永远是最快最简单的办法.
1.4>如果你不怕麻烦的话,可以自己摸索以下梯度洗脱,这个太麻烦.
第二：你可以用USP35或EP7.0的色谱条件试试.
第三：中国药典2010版中明确要求十二烷基硫酸钠的加入量是1.44g,你为何要改为1.11g?
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