PCR问题-野生型条带条带出不来怎么办啊

来源：学生作业帮编辑：作业帮分类：生物作业时间：2024/05/18 00:46:07

PCR问题-野生型条带条带出不来怎么办啊
我是用拟南芥幼嫩叶片直接抽提DNA作为模板检测突变体背景的,第一次PCR后跑电泳时特异性条带和野生型条带都很清楚也很亮,但从第二次开始野生型条带就时有时无的,特异性条带一直都有.我是用的三条引物一起P的,两两配对.引物没问题,Taq酶是自制的,退火温度是58度,请问这是怎么回事啊?

首先,你从第二次实验开始结果不同,你是否确定第一次和后面的实验条件全部一样?试剂全部出自同一个试管／批次?
你把三条引物全部加在同一个试管中了么?如果是这样两种条带的产物可能对共用的引物产生竞争,比如,有可能其中一对引物与特异性的序列结合度比较高.而且你说了一个退火温度,有没有计算过这个温度是否对三条引物都适合,是不是比较接近其中一对引物的理想温度而造成这种条带差异.你可以先分开p一下看看.

PCR目的条带的问题, PCR跑出的条带与目的条带不同怎么办 PCR跑出非特异条带?怎么办? PCR电泳,为什么没有条带啊? pcr结果出不来,每次都是只有100bp以下的条带,没有其他的条带 RAPD反应,DNA检测有条带,PCR没有条带,请问谁知道原因啊? 为什么我们做PCR扩增后条带出不来? PCR只有引物二聚体的条带,没有目的基因条带 RT-PCR 一对引物出很多条带 PCR电泳目的条带很浅 PCR电泳出现非特异条带原因 PCR扩增不出来条带的原因?