引物足够长但GC含量不足怎么办?

引物的长度包括酶切位点在内么?计算Tm值以及计算GC含量时用算酶切位点的么? PCR 引物设计,在扩增一个基因片段,1200bp左右,编码区1000个bp左右.由于上游引物GC含量高,我想分两段扩增 追问引物设计第一次PCR的产物胶回收后用纯化吗,还是可以直接当做底物?目的基因3‘端GC含量太高,导致上下游引物Tm值差 pcr 一段2000多bp的基因 引物设计时 条件怎么设 包括引物长度 gc含量等 因为我用软件设计时总是设不出来 可以 宝宝不吃奶粉,但我奶水又不足怎么办? 蛋白质、脂肪摄入不足,但糖分摄入足够,会有什么后果? pcr 引物特异性不好怎么办 带酶切位点的引物设计时计算Tm值,退火温度及GC含量时是否要把酶切位点和保护碱基计算在内?我觉得不用,因为酶切位点可以不 自来水水压不足,怎么办? 肝血不足怎么办 水泵压力不足怎么办? 家里水压不足怎么办