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用XhoⅠ和NdeⅠ双酶切pET30a质粒总是只有一条带怎么回事?

来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:综合作业 时间:2024/05/22 10:34:55
用XhoⅠ和NdeⅠ双酶切pET30a质粒总是只有一条带怎么回事?
我用XhoⅠ和NdeⅠ双酶切pET30a质粒,但是酶切后电泳检测总是只有一条带,感觉没有切开,我已经重复酶切多次,而且也用来连接过,事实证明确实没有酶切开.但是我反复检查自己的操作都不知道问题出在哪里?我实验室的师兄师姐也没办法了.
一条带就对了,要是没切开会有好几条带的,双酶切后的小片段太短了,只有大片段的百分之几,所以亮度也只有大片段的百分之几,仪器的灵敏度也是有限的,就像肉眼看不到细菌一样,看不到不表示不存在啊.