PBI121双酶切后回收不出来什么原因

来源：学生作业帮编辑：作业帮分类：综合作业时间：2024/05/26 14:28:26

PBI121双酶切后回收不出来什么原因
我用的酶切位点是BamH1和Sac1,切开之后带的亮度还可以,中孔的电泳我把三块胶切下来放一个管里回收的,回收试剂盒也是新的,我最后一般用30微升洗脱,但是回收之后跑电泳却没有带.

请问你回收的是载体还是片段.如果是分子量比较大的载体,那回收的成功率要高一些,如果是小分子量的片段,难度会大些.
其次,你说亮度还可以,这样的说法不太明确,跟MARKER相比亮度究竟如何?
最后,在回收的过程中也有很多需要注意的地方.比如加了SOLUTION one 后你的胶是否完全溶解?还有,回收中的很多步骤都需要把离心下来的液体再次过柱,提高产率,你是这么做的吗?
如果以上都没问题,建议你把回收过程中的洗脱液也泡个电泳,看DNA是否到了里面,如果有,说明之前操作失误.
克隆不是简单的事,加油!
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