为什么跑PCR要用CDNA,而不用本身的DNA呢
来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:生物作业 时间:2024/06/09 17:59:20
为什么跑PCR要用CDNA,而不用本身的DNA呢
你做的是不是RT-PCR哦 这个就是以反转录得到的cDNA为模板的
再问: 哦,那用mRNA反转录得到的DNA与原始体内的DNA有什么区别呢,为什么不能用本体内的DNA呢,麻烦您进一步解答
再答: 我们做的时候一般是提取植物总的RNA,然后采用Oligo(dT)或随机引物利用逆转录酶反转录成cDNA。再以cDNA为模板进行PCR扩增,主要是获得目的基因或检测基因表达,判断目的基因mRNA转录水平的相对量的变化。因为直接提取DNA的话,并不能证明该基因在其他细胞体内进行表达,通过这种方法可以克服假阳性。以上只是个人观点,仅供参考,o(∩_∩)o
再问: 哦,那用mRNA反转录得到的DNA与原始体内的DNA有什么区别呢,为什么不能用本体内的DNA呢,麻烦您进一步解答
再答: 我们做的时候一般是提取植物总的RNA,然后采用Oligo(dT)或随机引物利用逆转录酶反转录成cDNA。再以cDNA为模板进行PCR扩增,主要是获得目的基因或检测基因表达,判断目的基因mRNA转录水平的相对量的变化。因为直接提取DNA的话,并不能证明该基因在其他细胞体内进行表达,通过这种方法可以克服假阳性。以上只是个人观点,仅供参考,o(∩_∩)o
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