请问我提取蛋白,测浓度是2.0mg/ml,可是做sds-page电泳却看不到条带,不知道原因是什么
来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:综合作业 时间:2024/05/24 05:31:52
请问我提取蛋白,测浓度是2.0mg/ml,可是做sds-page电泳却看不到条带,不知道原因是什么
我是让同学帮我跑的电泳,用时2.5个小时,我用的是试剂盒定量的,Bradford法》,用的波长是570nm。我同学的跑出条带来,我的却没有,补充一下,我的是菌体全蛋白》,他们说是我的样本浓度太高了,电泳不出来,请问是这种原因么????
我是让同学帮我跑的电泳,用时2.5个小时,我用的是试剂盒定量的,Bradford法》,用的波长是570nm。我同学的跑出条带来,我的却没有,补充一下,我的是菌体全蛋白》,他们说是我的样本浓度太高了,电泳不出来,请问是这种原因么????
可能有以下几个原因:
一:上样缓冲液,用分子克隆上的配方做一次试试看(你所用的缓冲液是不是很久了?)
二:如果你染色,脱色都没有问题,PAGE胶是不会说谎的
三:不知道你是在哪种波长下所测得有数值?280nm是共轭双键的吸收波长,很多物质都会有吸收,如果做亲和层析时咪唑也有吸收,RNA在280下也有吸收,可能你测得的是RNA?
最后,想问问你的蛋白质Marker有没有显示条带?
一:上样缓冲液,用分子克隆上的配方做一次试试看(你所用的缓冲液是不是很久了?)
二:如果你染色,脱色都没有问题,PAGE胶是不会说谎的
三:不知道你是在哪种波长下所测得有数值?280nm是共轭双键的吸收波长,很多物质都会有吸收,如果做亲和层析时咪唑也有吸收,RNA在280下也有吸收,可能你测得的是RNA?
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