sds-page为什么跑不出蛋白条带?连marker也没有?请高手指教,
来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:生物作业 时间:2024/05/15 18:39:12
sds-page为什么跑不出蛋白条带?连marker也没有?请高手指教,
这个的确是不应该出现的情况,我想应该从分离胶和浓缩胶的配制上找原因,制备凝胶板:
(1)分离胶制备:按表配制20ml 10%分离胶,混匀后用细长头滴管将凝胶液加至长、短玻璃板间的缝隙内,约8cm高,用1ml注射器取少许蒸馏水,沿长玻璃板板壁缓慢注入,约3—4mm高,以进行水封.约30min后,凝胶与水封层间出现折射率不同的界线,则表示凝胶完全聚合.倾去水封层的蒸馏水,再用滤纸条吸去多余水分.
(2)浓缩胶的制备:按表配制10ml 3%浓缩胶,混匀后用细长头滴管将浓缩胶加到已聚合的分离胶上方,直至距离短玻璃板上缘约0.5cm处,轻轻将样品槽模板插入浓缩胶内,避免带入气泡.约30min后凝胶聚合,再放置20—30min.待凝胶凝固,小心拔去样品槽模板,用窄条滤纸吸去样品凹槽中多余的水分,将pH8.3 Tris-甘氨酸缓冲液倒入上、下贮槽中,应没过短板约0.5cm以上,即可准备加样.
(1)分离胶制备:按表配制20ml 10%分离胶,混匀后用细长头滴管将凝胶液加至长、短玻璃板间的缝隙内,约8cm高,用1ml注射器取少许蒸馏水,沿长玻璃板板壁缓慢注入,约3—4mm高,以进行水封.约30min后,凝胶与水封层间出现折射率不同的界线,则表示凝胶完全聚合.倾去水封层的蒸馏水,再用滤纸条吸去多余水分.
(2)浓缩胶的制备:按表配制10ml 3%浓缩胶,混匀后用细长头滴管将浓缩胶加到已聚合的分离胶上方,直至距离短玻璃板上缘约0.5cm处,轻轻将样品槽模板插入浓缩胶内,避免带入气泡.约30min后凝胶聚合,再放置20—30min.待凝胶凝固,小心拔去样品槽模板,用窄条滤纸吸去样品凹槽中多余的水分,将pH8.3 Tris-甘氨酸缓冲液倒入上、下贮槽中,应没过短板约0.5cm以上,即可准备加样.
sds-page电泳时蛋白样品没有跑出条带,
我初学蛋白质电泳试验,对这张蛋白质电泳图不知怎样看,分析?请问图中MARKer的每条带的数值是多少?SDS PAGE蛋白
sds-page蛋白表达量为什么几乎没有
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为什么我做Western,电泳时预染Marker很值条带也很清晰,但是转膜后膜上条带都没有了
蛋白纯化的问题我是用镍柱纯化的蛋白 非自然条件下的 包涵体的 但是跑sds-page没有条带或者是很不清楚,今天跑的什么
SDS电泳后不见条带怎么回事(有泳道,蛋白没有问题,点样没有问题)
sds page蛋白胶怎样保存
已知两个蛋白有相互作用,用其中一个蛋白的抗体做免疫共沉淀,SDS-PAGE胶电泳后出现几条带?
重组蛋白的检测通过SDS-PAGE中重组蛋白在蛋白MARKER的位置判断蛋白的表达情况 和 通过用标签抗体检测重组蛋白判
SDS PAGE 电泳为什么会跑歪?
pcr电泳结果特别不清晰,条带很模糊 连MARKER也看不清上样孔很亮,不加任何东西的上样孔都很亮