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sds-page为什么跑不出蛋白条带?连marker也没有?请高手指教,

来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:生物作业 时间:2024/05/15 18:39:12
sds-page为什么跑不出蛋白条带?连marker也没有?请高手指教,
这个的确是不应该出现的情况,我想应该从分离胶和浓缩胶的配制上找原因,制备凝胶板:
(1)分离胶制备:按表配制20ml 10%分离胶,混匀后用细长头滴管将凝胶液加至长、短玻璃板间的缝隙内,约8cm高,用1ml注射器取少许蒸馏水,沿长玻璃板板壁缓慢注入,约3—4mm高,以进行水封.约30min后,凝胶与水封层间出现折射率不同的界线,则表示凝胶完全聚合.倾去水封层的蒸馏水,再用滤纸条吸去多余水分.
(2)浓缩胶的制备:按表配制10ml 3%浓缩胶,混匀后用细长头滴管将浓缩胶加到已聚合的分离胶上方,直至距离短玻璃板上缘约0.5cm处,轻轻将样品槽模板插入浓缩胶内,避免带入气泡.约30min后凝胶聚合,再放置20—30min.待凝胶凝固,小心拔去样品槽模板,用窄条滤纸吸去样品凹槽中多余的水分,将pH8.3 Tris-甘氨酸缓冲液倒入上、下贮槽中,应没过短板约0.5cm以上,即可准备加样.