作业帮如何在真核生物中抽取表达蛋白?
来源：学生作业帮 编辑：作业帮 分类：生物作业 时间：2024/05/21 20:38:48
如何在真核生物中抽取表达蛋白?
如果是分泌蛋白,可以从培养上清中纯化.
如果是胞内蛋白,最好在蛋白上接一个TAG,比如FLAG-TAG,然后用FLAG的抗体进行亲和纯化.
再问： 谢谢您的回答 请问有没有具体的步骤 包括用的试剂和具体每步骤用的时间
再答： 那你需要提供更详细的信息。时间和试剂要看具体情况。
再问： 我想用lps刺激鸡HD11细胞然后让其产生HSP70蛋白，但是不知道它的刺激表达效果怎么样，所以看看有没有什么方法可以把这个蛋白抽取出来？
再答： 我没做过鸡细胞，也没做过HSP70，所以下面的粗浅建议仅供参考： 1.先作western-blot或者FACS，观察LPS刺激后，HSP70表达水平究竟如何。 2.查阅相关文献，看看同行分离或纯化该蛋白通常用什么办法。有些蛋白可能会有简单的纯化办法。 3.如果没有好的办法，那就自己克隆cDNA，链接TAG，然后导入合适的细胞表达，最后用亲和纯化。
如果是胞内蛋白,最好在蛋白上接一个TAG,比如FLAG-TAG,然后用FLAG的抗体进行亲和纯化.
再问： 谢谢您的回答 请问有没有具体的步骤 包括用的试剂和具体每步骤用的时间
再答： 那你需要提供更详细的信息。时间和试剂要看具体情况。
再问： 我想用lps刺激鸡HD11细胞然后让其产生HSP70蛋白，但是不知道它的刺激表达效果怎么样，所以看看有没有什么方法可以把这个蛋白抽取出来？
再答： 我没做过鸡细胞，也没做过HSP70，所以下面的粗浅建议仅供参考： 1.先作western-blot或者FACS，观察LPS刺激后，HSP70表达水平究竟如何。 2.查阅相关文献，看看同行分离或纯化该蛋白通常用什么办法。有些蛋白可能会有简单的纯化办法。 3.如果没有好的办法，那就自己克隆cDNA，链接TAG，然后导入合适的细胞表达，最后用亲和纯化。
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