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试叙述以野生型大肠杆菌为出发菌株,获得一株氨基酸营养缺陷型突变株的操作过程.

来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:生物作业 时间:2024/04/27 14:05:31
试叙述以野生型大肠杆菌为出发菌株,获得一株氨基酸营养缺陷型突变株的操作过程.
1.先要获得野生型大肠杆菌的纯培养物
2.诱变:可以选择各种诱变法,如紫外线诱变法,将一定浓度的菌液(可分成好几等分分别做实验)放在一定强度的紫外灯下照射,那分成的几等分可以分别照射10S,20S,30S,40S,50S,60S,注意,菌液不可太稀太浓,这个操作应该在黑暗的条件下进行,只允许有紫外光,以免光修复造成突变失败.
3.培养:将上述菌种分别涂抹在配好的完全培养基上(牛肉膏-蛋白胨培养基),倒置培养过夜
4,筛选:配置好基本培养基,再往上面添加一定浓度的氨基酸营养液,除了不要添加你说要得到的营养缺陷的那种氨基酸,必需氨基酸都要添加,再用影印法将3中的菌落印到这些培养基上,倒置培养过夜.
5.挑取:直接挑取4中培养基上的菌落,就是你要找的氨基酸营养缺陷突变菌株
在2中,之所以要分成好几份做,再以不同时间长短去照射,是为了加大筛选的效率时间过短,可能得不到想要的突变菌种,而时间过长,菌株全死,也得不到想要的菌株,所以这样做也可以算是一个试验性的步骤!