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请教各位我设计引物加了酶切位点和六个保护碱基,结果扩出来的片段短了,缺少我之前设计引物那段互补片段

来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:生物作业 时间:2024/05/25 06:22:18
请教各位我设计引物加了酶切位点和六个保护碱基,结果扩出来的片段短了,缺少我之前设计引物那段互补片段
请教各位我设计引物能扩增出目的片段,测序结果正确,设计表达引物直接在上面加了酶切位点和六个保护碱基,结果扩出来的片段短了,缺少我之前设计引物那段互补片段.请问怎么办?是不是加酶切位点后碱基匹配改变了?我在新设计引物时应注意什么?
你看看新加进去的酶切位点和保护碱基是不是能和你的基因片段匹配,如果匹配程度高的话,或者引物内部产生颈环结构的话,可能会造成扩增产物的异常.