作业帮pcr技术dna模板如何获得
来源：学生作业帮 编辑：作业帮 分类：综合作业 时间：2024/05/16 07:22:36
pcr技术dna模板如何获得
DNA 模板根据需要有多种获得方式：
1.如果需要的DNA是来自于样品的基因组,则需要抽提基因组DNA,这样可以获得绝大多数样品的DNA,以用于作为模板.由于不同样品的抽提方式不同,采用的试剂也各不一样,http://www.bioon.com/biology/biotech/78855.shtml的信息,里面包含了植物,动物,细菌等的基因组抽提方法,还是比较全面的.当然,也可以直接购买基因组DNA抽提试剂盒.
2.如果需要的DNA是质粒,可以直接购买质粒提取试剂盒,或者是参照《分子克隆》上质粒抽提的方法来进行质粒的分离.这样获得的DNA可以避免基因组DNA的干扰.但是对于特别大的质粒,可能只能用手动方法进行提取.
3.最简单的方式是直接PCR,不抽提DNA,直接对样品进行煮沸,或者是裂解的处理,取一部分溶液作为模板扩增即可.只要溶液中含有少量的DNA就可以成功扩增.但此种方法的缺点是,由于未对DNA进行分离,所以含有杂质较多,有可能会干扰到扩增的效果,例如效率或者是特异性等.
追问中提到的基因组文库,实际上是很多构建好的质粒,所以从文库中获得DNA的话,一般是采用质粒提取的方法.所以需要了解,构建文库的载体都是什么类型的质粒,以确认相应的抽提方式.
1.如果需要的DNA是来自于样品的基因组,则需要抽提基因组DNA,这样可以获得绝大多数样品的DNA,以用于作为模板.由于不同样品的抽提方式不同,采用的试剂也各不一样,http://www.bioon.com/biology/biotech/78855.shtml的信息,里面包含了植物,动物,细菌等的基因组抽提方法,还是比较全面的.当然,也可以直接购买基因组DNA抽提试剂盒.
2.如果需要的DNA是质粒,可以直接购买质粒提取试剂盒,或者是参照《分子克隆》上质粒抽提的方法来进行质粒的分离.这样获得的DNA可以避免基因组DNA的干扰.但是对于特别大的质粒,可能只能用手动方法进行提取.
3.最简单的方式是直接PCR,不抽提DNA,直接对样品进行煮沸,或者是裂解的处理,取一部分溶液作为模板扩增即可.只要溶液中含有少量的DNA就可以成功扩增.但此种方法的缺点是,由于未对DNA进行分离,所以含有杂质较多,有可能会干扰到扩增的效果,例如效率或者是特异性等.
追问中提到的基因组文库,实际上是很多构建好的质粒,所以从文库中获得DNA的话,一般是采用质粒提取的方法.所以需要了解,构建文库的载体都是什么类型的质粒,以确认相应的抽提方式.
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