质谱能测聚丙烯酰胺电泳中不同普带酯酶同工酶分子量及结构吗

来源：学生作业帮编辑：作业帮分类：化学作业时间：2024/05/15 16:36:01

质谱能测聚丙烯酰胺电泳中不同普带酯酶同工酶分子量及结构吗
电泳跑出来的条带,不知道能否像2D那样挖胶测分子量

可以把含蛋白质的聚丙烯酰胺胶分别挖下来,做胶内酶解（用测序级trypsin）,使蛋白质变成肽端,再采用乙腈等化学溶剂将其萃取出来,除盐,冻干.用碳酸氢铵复溶,上ESI-LTQ质谱,测每段肽的序列,然后通过数据库搜索,用鉴定到的肽去mapping蛋白质.但是如果用ESI-LTQ,很有可能无法鉴定蛋白质的isoform,但是可以得到蛋白质的序列.如果事先不酶解,采用MALDI-TOF,可以对蛋白质的总分子量进行精确鉴定,但是序列信息不容易得到.
无论使用哪种质谱方法,最多能够得到的蛋白质的一级序列,无法得到更高级的序列信息.

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